Uji aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak bunga telang (Clitoria ternatea) dan jeruk nipis (Citrus aurantifolia) terhadap Shigella dysenteriae secara in vitro

ABSTRAK:

Diare masih menjadi penyakit endemis yang banyak disebabkan oleh infeksi
mikroorganisme, salah satunya Shigella dysenteriae, bakteri penyebab diare yang sangat virulen dan telah menunjukkan resistensi terhadap berbagai antibiotik. Sebagai alternatif pengobatan, kombinasi bunga telang (Clitoria ternatea) dan jeruk nipis (Citrus aurantiifolia) berpotensi digunakan karena kandungan senyawa bioaktifnya yang bersifat antibakteri dan diduga bekerja sinergis dalam menghambat pertumbuhan bakteri. Penelitian ini bertujuan menentukan perbandingan terbaik kombinasi ekstrak bunga telang dan jeruk nipis serta mengukur Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) terhadap S. dysenteriae. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan lima perlakuan, yaitu P1 (25%:75%), P2 (50%:50%), P3 (75%:25%), P4 (C. ternatea), dan P5 (C. aurantiifolia) pada konsentrasi 25%. Aktivitas antibakteri diuji menggunakan metode difusi cakram, sedangkan KHM ditentukan dengan metode mikrodilusi pada perlakuan terbaik. Data zona hambat dianalisis menggunakan uji Kruskal–Wallis dan data KHM
dianalisis secara deskriptif berdasarkan pengamatan visual serta absorbansi microplate reader. Hasil penelitian menunjukkan bahwa P1 menghasilkan aktivitas antibakteri terbaik dengan rata-rata diameter zona hambat 7,5 mm (kategori sedang), sedangkan P2, P3, P4, dan P5 berturut-turut menghasilkan zona hambat 2,8 mm, 3,0 mm, 3,8 mm, dan 4,8 mm (kategori lemah). Nilai KHM kombinasi ekstrak terhadap S. dysenteriae diperoleh pada
konsentrasi 3,125%. Kombinasi P1 berpotensi dikembangkan sebagai agen antibakteri alami karena menghasilkan nilai KHM yang lebih baik dibandingkan sebagian besar ekstrak tunggal yang telah dilaporkan;

ABSTRACT:

Diarrhea remains an endemic disease and a major cause of early childhood mortality, one of which is caused by Shigella dysenteriae infection. This bacterium has developed resistance to various antibiotics, highlighting the need for alternative plant-based treatments. Butterfly pea (Clitoria ternatea) and lime (Citrus aurantiifolia) are known to contain bioactive compounds with antibacterial potential and are expected to exhibit enhanced activity when combined. Bioactive compounds from lime may destabilize the bacterial outer membrane, thereby facilitating the penetration of butterfly pea bioactive compounds into the cell and enhancing antibacterial activity. This study aimed to determine the optimal ratio of butterfly pea and lime extracts and to evaluate their Minimum Inhibitory Concentration (MIC) against S. dysenteriae. A Completely Randomized Design (CRD) was employed with five treatments: P1 (25%:75%), P2 (50%:50%), P3 (75%:25%), P4 (C. ternatea), and P5 (C. aurantiifolia), all at a concentration of 25%. Antibacterial activity was assessed using the disk diffusion method, while MIC was determined by the microdilution method using the best-performing treatment. Inhibition zone data were analyzed using the Kruskal–Wallis test, whereas MIC data were analyzed descriptively based on visual observations and microplate reader absorbance values. The results showed that P1 exhibited the highest antibacterial activity with an average inhibition zone diameter of 7.5 mm (moderate category), while P2, P3, P4, and P5 produced inhibition zones of 2.8 mm, 3.0 mm, 3.8 mm, and 4.8 mm, respectively (weak category). The MIC of the extract combination against S. dysenteriae was 3.125%. The P1 combination has potential to be developed as a natural antibacterial agent due to its lower MIC value compared with most previously reported single extracts;

مستخلص البحث:

لا يزال الإسهال مرضًا متوطنًا ويُعد أحد الأسباب الرئيسية لوفيات الأطفال في سن مبكرة، ومن أسبابه الإصابة ببكتيريا الشيغيلا الزحارية (Shigella dysenteriae). وقد أظهرت هذه البكتيريا مقاومةً للعديد من المضادات الحيوية، مما يستدعي البحث عن بدائل علاجية قائمة على النباتات. ومن المعروف أن زهرة البازلاء الزرقاء (Clitoria ternatea) والليمون الحامض (Citrus aurantiifolia) يحتويان على مركبات حيوية فعالة ذات خصائص مضادة للبكتيريا، ويُتوقع أن تكون فعاليتهما أكبر عند دمجهما معًا. إذ يمكن للمركبات الحيوية الموجودة في الليمون الحامض أن تُضعف الغشاء الخارجي للبكتيريا، مما يسهل نفاذ المركبات الحيوية الموجودة في زهرة البازلاء الزرقاء إلى داخل الخلية ويعزز النشاط المضاد للبكتيريا. هدفت هذه الدراسة إلى تحديد أفضل نسبة لدمج مستخلصي زهرة البازلاء الزرقاء والليمون الحامض، وقياس التركيز المثبط الأدنى (MIC) ضد بكتيريا الشيغيلا الزحارية. استُخدم تصميم عشوائي كامل بخمس معاملات هي: P1 (25%:75%)، وP2 (50%:50%)، وP3 (75%:25%)، وP4 (C. ternatea)، وP5 (C. aurantiifolia)، جميعها بتركيز 25%. تم تقييم النشاط المضاد للبكتيريا باستخدام طريقة انتشار الأقراص، بينما حُدد التركيز المثبط الأدنى بطريقة التخفيف الدقيق للمعاملة الأفضل أداءً. أظهرت النتائج أن المعاملة P1 حققت أعلى نشاط مضاد للبكتيريا بمتوسط قطر منطقة تثبيط بلغ 7.5 مم (فئة متوسطة)، في حين حققت المعاملات P2 وP3 وP4 وP5 مناطق تثبيط بلغت 2.8 مم و3.0 مم و3.8 مم و4.8 مم على التوالي (فئة ضعيفة). كما بلغ التركيز المثبط الأدنى لمزيج المستخلصات ضد بكتيريا الشيغيلا الزحارية 3.125%. وتُظهر نتائج الدراسة أن مزيج P1 يمتلك إمكانات واعدة للتطوير كعامل طبيعي مضاد للبكتيريا نظرًا لانخفاض قيمة MIC مقارنةً بمعظم المستخلصات المفردة التي أُبلغ عنها سابقًا.