Pengaruh ekstrak etanol 70% alfalfa dengan induksi H₂O₂ terhadap kualitas spermatozoa Mus musculus secara in vitro

INDONESIA:

Hidrogen peroksida merupakan kelompok ROS yang berperan sebagai sumber radikal bebas dan menyebabkan kerusakan oksidatif sehingga menurunkan kualitas spermatozoa. Pada kondisi tersebut, diperlukan senyawa antioksidan yang mampu menekan radikal bebas, baik secara endogen ataupun eksogen. Salah satu antioksidan alami yang berpotensi mengurangi aktivitas radikal bebas adalah ekstrak etanol 70% alfalfa. Oleh sebab itu, penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh ekstrak etanol 70% alfalfa dengan induksi H2O2 terhadap kualitas spermatozoa Mus musculus secara in vitro. Penelitian ini dilakukan secara eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial yang terdiri dari dua faktor perlakuan, yaitu H2O2 (0, 10, dan 50 µM) dan ekstrak etanol 70% alfalfa (0%, 2%, dan 6%) dengan tiga ulangan. Kualitas spermatozoa setelah pemberian ekstrak alfalfa, induksi H2O2, maupun kombinasi keduanya dianalisis berdasarkan parameter motilitas, viabilitas dan integritas membran setelah inkubasi 30 menit pada suhu 37 ºC. Data yang diperoleh kemudian dianalisis secara statistik menggunakan two-way ANOVA dan dilanjutkan uji Duncan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol 70% alfalfa maupun induksi H2O2 secara tunggal tidak berpengaruh terhadap motilitas dan viabilitas spermatozoa (p>0,05), namun berpengaruh terhadap integritas membran spermatozoa (p<0,05). Sebaliknya, terdapat interaksi antara ekstrak etanol 70% alfalfa dengan H2O2 terhadap viabilitas spermatozoa (p<0,05), namun kedua faktor tidak berinteraksi terhadap motilitas dan integritas membran spermatozoa Mus musculus secara in vitro (p>0,05). Secara keseluruhan, konsentrasi ekstrak alfalfa 2% menunjukkan pengaruh terbaik dibandingkan konsentrasi 6%. Temuan ini mengindikasikan bahwa interaksi antara ekstrak alfalfa dengan H2O2 dapat mengubah pola respons spermatozoa dibandingkan jika diberikan secara tunggal.

ENGLISH:

Hydrogen peroxide is a group of ROS that acts as a source of free radicals and causes oxidative damage so as to reduce the quality of spermatozoa. In these conditions, antioxidant compounds are needed that are able to suppress free radicals, both endogenous and exogenous. One of the natural antioxidants that has the potential to reduce free radical activity is 70% alfalfa ethanol extract. Therefore, this study was conducted to determine the effect of 70% alfalfa ethanol extract with H2O2 induction on the quality of spermatozoa Mus musculus) in vitro. This study was conducted experimentally using a factorial Complete Random Design (RAL) consisting of two treatment factors, namely H2O2 (0, 10, and 50 μM) and ethanol extract of 70% alfalfa (0%, 2%, and 6%) with three replicas. The quality of spermatozoa after alfalfa extract, H2O2 induction, and a combination of both were analyzed based on the parameters of motility, viability and membrane integrity after 30 minutes of incubation at 37 ºC. The data obtained were then statistically analyzed using two-way ANOVA and continued the Duncan test. The results showed that ethanol extract of 70% alfalfa and induction of H2O2 alone did not affect spermatozoa motility and viability (p>0.05), but did affect spermatozoa membrane integrity (p<0.05). In contrast, there was an interaction between 70% alfalfa ethanol extract and H2O2 on spermatozoa viability (p<0.05), but the two factors did not interact on the motility and membrane integrity of Mus musculus spermatozoa in vitro (p>0.05). Overall, the alfalfa extract concentration of 2% showed the best effect compared to the concentration of 6%. These findings indicate that the interaction between alfalfa extract and H2O2 can alter the response pattern of spermatozoa compared to if administered solely.

ARABIC:

بيروكسيد الهيدروجين هو مجموعة من ROS تعمل كمصدر للجذور الحرة وتسبب أضرارا تأكسدية لتقليل جودة الحيوانات المنوية. في هذه الحالات، تكون المركبات المضادة للأكسدة ضرورية قادرة على كبح الجذور الحرة، سواء الداخلية أو الخارجية. أحد مضادات الأكسدة الطبيعية التي لديها القدرة على تقليل نشاط الجذور الحرة هو مستخلص إيثانول البرسيم بنسبة 70٪. لذلك، أجريت هذه الدراسة لتحديد تأثير مستخلص إيثانول البرسيم بنسبة 70٪ مع تحفيز H2O2 على جودة حيوانات المنوية Mus musculus في المختبر. أجريت هذه الدراسة تجريبيا باستخدام تصميم عشوائي كامل (RAL) يتكون من عاملي معالجة، وهما H2O2 (0، 10، و50 ميكرومتر) ومستخلص الإيثانول بنسبة 70٪ برسيم (0٪، 2٪، و6٪) مع ثلاث نسخ مكررة. تم تحليل جودة الحيوانات المنوية بعد مستخلص البرسيم، وتحفيز H2O2، ومزيج من الاثنين بناء على معايير الحركة، وقابلية البقاء، وسلامة الغشاء بعد 30 دقيقة من الحضانة عند 37 درجة مئوية. ثم تم تحليل البيانات التي تم الحصول عليها إحصائيا باستخدام تحليل النوفاين ثنائي الاتجاهواستمر في اختبار دنكان. أظهرت النتائج أن مستخلص الإيثانول الذي يحتوي على 70٪ من البرسيم وتحفيز H2O2 وحده لم يؤثرا على حركة الحيوانات المنوية وقابليتها للبقاء (p>0.05)، لكنه أثر على سلامة غشاء الحيوانات المنوية (p<0.05). على النقيض من ذلك، كان هناك تفاعل بين مستخلص الإيثانول بنسبة 70٪ من البرسيم وH2O2 على مدى بقاء الحيوانات المنوية (ص<0.05)، لكن لم يكن هناك تفاعل بين حركة وسلامة الغشاء في أغشية الحيوانات المنوية في المختبر (ص>0.05). بشكل عام، أظهر تركيز مستخلص البرسيم بنسبة 2٪ أفضل تأثير مقارنة بتركيز 6٪. تشير هذه النتائج إلى أن التفاعل بين مستخلص البرسيم وH2O2 يمكن أن يغير نمط استجابة الحيوانات المنوية مقارنة بإعطائها بشكل فردي