Uji toksisitas pigmen fikosianin pada Spirulina platensis hasil fraksinasi amonium sulfat dengan variasi konsentrasi

ABSTRAK

Spirulina platensis merupakan alga biru-hijau karena adanya pigmen klorofil (yang memberikan warna hijau) dan fikosianin (yang memberikan warna biru) dalam struktur selularnya. Pigmen fikosianin yang terkandung dalam Spirulina platensis memiliki banyak manfaat salah satunya sebagai obat seperti anti peradangan, antioksidan, antidiabetes, menghambat pertumbuhan koloni kanker, dan masih banyak lagi. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui konsentrasi amonium sulfat terbaik dalam memurnikan pigmen fikosianin dan mengetahui aktivitas dari pigmen fikosianin pada hasil dialisis fraksinasi amonium sulfat masing-masing konsentrasi dan ekstrak kasar Spirulina platensis masing-masing metode pengeringan dengan uji toksisitas menggunakan metode BSLT.

Metode ekstraksi freeze-thaw digunakan untuk proses pengambilan pigmen fikosianin pada Spirulina platensis dengan pelarut buffer fosfat pH 7. Ekstrak yang didapat selanjutnya dimurnikan dengan metode fraksinasi menggunakan variasi konsentrasi amonium sulfat, kemudian didialisis dengan membran selofan. Hasil ekstrak Spirulina platensis dari masing-masing metode pengeringan dan dialisat masing-masing fraksi diuji toksisitas menggunakan metode BSLT. Selanjutnya hasil ekstrak kasar dan dialisat diidentifikasi pigmen fikosianinnya menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

Hasil pemurnian pigmen fikosianin pada Spirulina platensis terbaik terjadi pada konsentrasi amonium sulfat 30% dan uji toksisitas pigmen fikosianin pada ekstrak kasar metode pengeringan freeze drying, ekstrak kasar metode pengeringan kering angin, dialisat fraksi 25%, dan dialisat fraksi 30% masing-masing memiliki nilai LC50 435,718 ppm; LC50 286,374 ppm; LC50 201,968 ppm; dan LC50 200,168 ppm. Hasil identifikasi menggunakan spektrofotometer UV-Vis menunjukkan keberadaan panjang gelombang maksimum pigmen fikosianin pada ekstrak kasar metode pengeringan freeze drying, ekstrak kasar metode pengeringan kering angin, dialisat fraksi 25%, dan dialisat fraksi 30% masing-masing yaitu 617 nm, 620 nm, 610 nm, dan 615 nm, panjang gelombang maksimum tersebut masih berada di rentang panjang gelombang maksimum dari pigmen fikosianin yaitu pada 610-620 nm.

ABSTRACT

Spirulina platensis is blue-green algae because of chlorophyll pigment (which gives green) and phycocyanin (which give blue) in its cellular structure. The phycocyanin pigments contained in Spirulina platensis have many benefits, one of which is as a medicine such as anti-inflammatory, antioxidant, antidiabetic, inhibiting the growth of cancer colonies, and many more. The purpose of this study is to know the best concentration of ammonium sulfates in refining phycocyanin pigments and to know the activity of phycocyanin pigments on ammonium sulfates and crude extract of Spirulina platensis each drying method with toxicity tests using BSLT.

A freeze-thaw extraction method was used for phycocyanin pigment retrieval in Spirulina platensis with a phosphate buffer solution pH 7. The extract is further refined by fractionation using variations in the concentration of ammonium sulfates and then dialyzed with a phosphate buffer. The extract of Spirulina platensis from each drying method and dialysis of each faction tested for toxicity using the BSLT method. Furthermore, the results of the crude extract and dialysis identified their phycocyanin pigment using a UV-vis spectrophotometer.

The best results of phycocyanin pigment separation in Spirulina platensis occurred at 30% ammonium sulfate concentration and toxicity test on freeze drying crude extract, aerated crude extract, 25% dialysate fraction, and 30% dialysate fraction, respectively. has an LC50 value of 435,718 ppm; LC50 286.374 ppm; LC50 201,968 ppm; and LC50 200.168 ppm. The results of the identification using a UV-Vis spectrophotometer showed the presence of the maximum wavelength of phycocyanin pigment in the crude extract of the freeze drying method, the crude extract of the aerated drying method, the 25% dialysate fraction, and the 30% dialysate fraction, namely 617 nm, 620 nm, 610 nm, and 615 nm, the maximum wavelengths are still in the maximum wavelength range of phycocyanin pigments at 610-620 nm.

مستخلص البحث

سَبِيْرُوْلِيْنَا فُلَاتِنسِيْس (Spirulina Platensis) هُوَ الطُّحْلُبُ الْأَزْرَقُ- الْأَخْضَرُ بِسَبَبِ وُجُوْدِ أَصْبَاغِ الْكُلُوْرُوْفِيْلِ (الَّتِيْ تُعْطِي اللَّوْنَ الْأَخْضَرَ) وَ الْفِيْكُوْسِياَنِيْن (الَّذِيْ يُعْطِي اللَّوْنَ الْأَزْرَقَ) فِيْ هَيْكَلِهاَ الْخَلَوِيَّةِ. تَحْتَوِي صِبْغَةُ الْمَوْجُوْدَةِ فِيْ سبيرولينا فلاتنسيس لَهَا الْعَدِيْدُ مِنَ الْفَوَائِدِ، أَحَدُهَا كَدَوَاءٍ مِثْلُ مُضاَدَاتِ الْإِلْتِهَابِ وَمُضَادَاتِ الْأَكْسِدَةِ وَمُضَادَاتِ السُّكَّرِي، وَثَبَّطَ نُمُوُّ مُسْتَعْمَرَاتِ السَّرَطَانِ، وَغَيْرُهَا الْكَثِيْرُ. الْأَهْدَافُ مِنْ هٰذا الْبَحْثِ هِيَ مَعْرِفَةُ أَفْضَلِ تَرْكِيْزِ كبريتات الأمونيوم فِي تَنْقِيَةِ أصْبَاِغ الْفِيْكُوْسِياَنِيْن. وَ مَعْرِفَة نَشَاطِ أَصْباَغِ الْفِيْكُوْسِياَنِيْن عَلٰى نَتَائِجَ تَجْزِئَةِ غَسِيْلِ الٰكُلِىِّ لِكِبْرِيْتَاتٍ الْأَمونيوم لِكُلِّ تَرْكِيْزٍ وَ مُسْتَخْلِصٍ خَامٍ مِنْ سَبِيْرُوْلِيْنَا فُلَاتِنسِيْس لِكُلِّ طَرِيْقَةٍ تَجْفِيْفٍ مَعَ اخْتِباَرِ التَّسَمُّمِ باِسْتِخْدَامِ طَرِيْقَةِ BSLT.

ُسْتُخْدِمَ طَرِيْقَةُ الْاِسْتِخْرَاجِ بالتجميد وَ الذَّوَبَانِ لِمُعَالَجَةِ صِبْغَةِ الْفِيْكُوْسِيَانِيْن فِيْ سَبِيْرُوْلِيْناَ فُلَاتُنْسِيْس مَعَ دَرَجَةِ حُمُوْضَةٍ عَازِلَةٍ لِلْفُوسْفاَتِ تَبْلُغُ pH-7. نُقِّيَ اسْتِخْرَاجُ الْمَحْصُوْلِ بِطَرِيْقَةِ التَّجْزِئَةِ باِسْتِخْدَامِ تَرْكِيْزَاتٍ مُخْتَلِفَةٍ مِنْ كِبْرِيْتَاتِ الْأَمُوْنِيُوْمِ، ثُمَّ تَمَّ غَسِيْلُهَا بِمُذِيْبِ الْفُوسْفَاتِ. تَمَّ اخْتِبَارُ تَسَمُّمِ مُسْتَخْلِصِ سَبِيْرُوْلِيْناَ فُلَاتُنْسِيْس مِنْ كُلِّ طَرِيْقَةِ تَجْفِيْفٍ وَغَسِيْلِ الْكُلِّى لِكُلِّ جُزْءٍ بِاسْتِخْدَامِ طَرِيْقَةِ BSLT. ثُمَّ حُقِّقَ نَتَائِجُ الْمُسْتَخْلِصِ الْخاَمِ وَغَسِيْلِ الْكُلِّى بِصِبْغَةِ الْفِيْكُوْسِيَانِيْن بِاسْتِخْدَامِ مِقْيَاسِ الطَّيْفِ الضَّوْئِيِّ بِالْأَشِعَّةِ الْمَرْئِيَّةِ وَفَوْقَ البَّنَفْسَجِيَّةِ.

نَتاَئِجُ انْفِصَالِ أَصْبَاغِ الْفِيْكُوْسِيَانِيْن فِيْ سَبِيْرُوْلِيْناَ فُلَاتُنْسِيْس حَدَّثَتْ عِنْدَ ٣٠٪ تَرْكِيْزِ كِبْرِيْتَاتِ الْأَمُوْنِيُوْمِ وَ اخْتِبَارِ تَسَمُّمِ صِبْغَةِ الْفِيْكُوْسِيَانِيْن عَلٰى طَرِيْقَةِ اسْتِخْرَاجِ الْخَامِ باِلتَّجْمِيْدِ وَ التَّجْفِيْفِ، وَ طَرِيْقَةِ التَّجْفِيْفِ بِالْهَوَاءِ باِلْمُسْتَخْلِصِ الْخَامِ، وَ ٢٥٪ مِنَ الدِّيَالَةِ، وَ ٣٠٪ مِنَ الدِّيَالَةِ عَلٰى التَّوَالِي. قِيْمَةُ LC50 تَبْلُغُ ٤٣٥.٧١٨ جُزْءٍ فِيْ الْمِلْيُوْنِ؛ ٢٨٦.٣٧٤ LC50 جُزْءٍ فِيْ الْمِلْيُوْنِ؛ ٢٠١.٩٦٨ LC50 جُزْءٍ فِيْ الْمِلْيُوْنِ؛ و ٢٠٠.١٦٨ LC50 صَفْحَةٍ فِيْ الدَّقِيْقَةِ. دَلَّتْ نَتاَئِجُ التَّحْقِيْقِ بِاسْتِخْدَامِ مِقْيَاسِ الطَّيْفِ الضَّوْئِيِّ بِالْأَشِعَّةِ الْمَرْئِيَّةِ وَ فَوْقَ البَّنَفْسَجِيَّةِ وَ جُوْدِ الطَّوْلِ الْمَوْجِيِّ الْأَقْصَى لِصِبْغَةِ الْفِيْكُوْسِياَنِيْن فِيْ طَرِيْقَةِ التَّجْفِيْفِ بِالتَّجْمِيْدِ بِالْمُسْتَخْلِصِ الْخَامِ وَطَرِيْقَةِ تَجْفِيْفِ الْمُسْتَخْلِصِ الْخَامِ بِالْهَوَاءِ وَدَالَّةِ الْكَسْرِ بِنِسْبَةٍ ٢٥٪ وَدَالَّةِ الْكَسْرِ بِنِسْبَةٍ ٣٠٪ عَلٰى التَّوَالِي، وٕ هِيَ ٦١٧ نانومتر، ٦٢٠ نانومتر، ٦١٠ نانومتر، ٦١٥ نانومتر، لَا تَزَالُ الْأَطْوَالُ الْمَوْجِيَّةُ الْقُصْوَى فِيْ نِطَاقِ الطَّوْلِ الْمَوْجِيِّ الْأَقْصٰى لِأَصْبَاغِ فِيْكُوْسِيَانِيْن، أَيّ عِنْدَ ٦١٠-٦٢٠ نَانُوْمِتْر.