Uji toksisitas dan identifikasi senyawa Metabolit sekunder Mikroalga Chlorella sp. hasil Ekstraksi Sonikasi Fraksi Etil Asetat, Dietil Eter, dan N-Heksana

ABSTRAK

Mikroalga Chlorella sp. merupakan salah satu tumbuhan tingkat rendah yang mengandung senyawa senyawa aktif yang bisa dimanfaatkan sebagai obat. Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah untuk mengetahui tingkat toksisitas fraksi etil asetat, dietil eter, dan n-Heksana ekstrak metanol terhadap larva udang Artemia salina Leach dan mengetahui golongan senyawa aktif yang memiliki tingkat toksisitas yang paling tinggi pada ekstrak.

Mikroalga Chlorella sp. dikultivasi menggunakan Medium Ekstrak Tauge (MET) 4%. Biomassa yang diperoleh dikeringkan dan dilakukan sonikasi menggunakan pelarut metanol. Selanjutnya dilakukan hidrolisis dengan penambahan asam dan dipartisi dengan pelarut etil asetat, dietil eter, dan n-Heksana. Masing-masing fraksi diuji tingkat toksisitasnya terhadap larva udang Artemia salina Leach dan diidentifikasi menggunakan spektrofotometri UV-Vis.

Hasil uji toksisitas mikroalga Chlorella sp. fraksi etil asetat, dietil eter, dan n-heksana masing-masing memiliki nilai LC50 berturut-turut 107,709; 163,884; dan 123,219 ppm. Uji fitokomia yang dilakukan pada masing-masing fraksi diperoleh senyawa metabolit sekunder berupa steroid diketiga fraksinya. Identifikasi dengan spektrofotometer UV-Vis menunjukan adanya transisi elektron π → π* dari ikatan C=C yang tidak terkonjugasi. Berdasarkan analisis menggunakan LC-MS/MS senyawa steroid yang terkandung dalam fraksi etil asetat adalah kolesterol, stigmasterol, β-sitosterol, brassicasterol, campesterol, dan cycloartenol.

ABSTRACT

Microalgae Chlorella sp. is one of the low-level plants that contain active compounds that can be used as medicine. The purpose of this study was to determine the level of toxicity of the ethyl acetate, diethyl ether, and n-hexane fractions of methanol extract against Artemia salina Leach shrimp larvae and classify the active compounds that had the highest level of toxicity in the extract.

Microalgae Chlorella sp. cultivated using 4% Bean sprout Extract Medium. The obtained biomass was dried and sonicated using methanol as a solvent. Furthermore, hydrolysis was carried out with the addition of acid and partitioned with ethyl acetate, diethyl ether, and n-hexane as solvents. Each fraction was tested for its toxicity level to Artemia salina Leach shrimp larvae and identified using UV-Vis spectrophotometry.

The results of the toxicity test of the microalgae Chlorella sp. the ethyl acetate, diethyl ether, and n-hexane fractions each had LC50 values of 107,709; 163,884; and 123,219 ppm. Phytochemical tests performed on each fraction obtained secondary metabolites in the form of steroids in all three fractions. Identification by UV-Vis spectrophotometer shows the presence of electron transitions π → π* from unconjugated C=C bonds. Based on LC-MS/MS analysis Steroid compounds contained in the ethyl acetate fraction there are cholesterol, stigmasterol, β-sitosterol, brassicasterol, campesterol, and cycloartenol.

مستخلص البحث

الطَّحَالِبُ الدَّقِيْقَةُ Chlorella sp. هِيَ إِحْدَى النَّبَاتاَتُ مُنْخَفِضَةُ المُسْتَوَى الَّتِي تَحْتَوِي عَلَى الصَّوْتَنَةِ المُنْشِطَةِ يُمْكِنُ اِسْتِفَادُهَا كَالدَّوَاءِ. كاَنَ الغَرْضُ مِنْ هَذَا البَحْثِ هُوَ مَعْرِفَةُ مُسْتَوَى سَمِّيَّةُ أَسِيْتَاتُ الإِيْثِيْلُ، وَثَنَائِي الاَثِيْرِ، وَأَجْزَاءُ الهَكْسَانِ مِنْ مُسْتَخْلِصِ المِيْثَانُوْلِ لِيْرِقًاتِ الجَمِبْرِي Artemia salina Leach وَمَعْرِفَةُ أَيُّ مِجْمُوْعَةٍ مِنَ الصَّوْتَنَةِ المُنْشِطَةِ الَّتِي تَحْتَوِي عَلَى أَعْلَى مُسْتَوَى مِنْ تَسَمُّمٍ.

تَمَّتِ الزَّرَاعَةِ لِلطَّحَالِبِ الدَّقِيْقَةِ Chlorella sp باِسْتِخْدَامِ 4٪ مِنْ مُسْتَخْلِصِ البَرْعَمِ المُتَوَسِّطِ (MET). يَتِمُّ ِتَجْفِيْفِ الكَتْلَةِ الحَيَوِيَّةِ الَّتِي تَمَّ الحُصُوْلِ عَلَيْهَا وَصَوَّتُهَا باِسْتِخْدَامِ المِيثَانُوْلِ كَمُذَيَّبِ. عَلَاوَةً عَلَى ذَلِكَ، تَمَّ إِجْرَاءُ التَّحَلُّلِ المَائِي عَنْ طَرِيْقِ إِضَافَةِ حَمْضِ وَتَقْسِيْمَهُ باِسْتِخْدَامِ مُذَيَّبَاتِ إِيْثِيْلِ أَسِيْتَاتُ وَثَنَائِي اَثِيْرِ ون-هَكْسَانَ. تَمَّ تَجْرِبَةُ كُلُّ جُزْءٍ لِمَعْرِفَةِ مُسْتَوَى سَمِّيَتُهُ لِيْرِقَاتِ الجَمْبَرِي Artemia salina Leach وَتَمَّ مُسْتَحْضِرٌ بِاسْتِخْدَامِ مِقْيَاسِ الطَّيْفِ باِلْأَشْعَةِ المَرْئِيَةِ وَفَوْقَ البَنَفْسَجِيَّةِ.

نَتَائِجُ تَجْرِبَةُ السَّمِّيَّةِ الطَّحَالِبِ الدَّقِيْقَةِ Chlorella sp. لِلْكَسْرِ الأَسِيْتَاتِ الإِيْثِيْلِ وَالثَّنَائِي الاَثِيْرِ وَأَجْزَاءِ الهَكْسَانِ قَيَمَ التَّرْكِيْزِ المُمَيِّتِ النِّصْفِي لِكُلِّ مِنْ 107.709 ؛ 163،884 ؛ و 123.219 صَفْحَةٍ فِي الدَّقِيْقَةِ. تَمَّ إِجْرَاءِ التَّجْرِبَةِ الكِيْمِيَائِي النَّبَاتِي الَّذِي تَمَّ إِجْرَاؤُهُ عَلَى كُلًّ جُزْءٍ وَتَمَّ الحُصُوْلِ عَلَى مُسْتَقْلِبَاتِ ثاَنَوِيَّةِ فِي شَكْلِ مُنْشِطَاتِ فِي الكُسُوْرِ الثَّلَاثَةِ. يُظْهَرُ المُسْتَحْضَرِ باِسْتِخْدَامِ مِقْيَاسِ الطَّيْفِ الضَّوْئِي باِلأَشْعَةِ المَرْئِيَّةِ وَفَوْقَ البَنَفْسَجِيَّةِ وُجُوْدِ اِنْتِقَالَاتِ الإلكتِرُوْنِ → π * مِنْ رَوَابِطِ C = C. تَشْتَمِلُ مَرْكَبَاتُ السَّتِيْرويدِ المَوْجُوْدَةِ فيِ جُزْءٍ أَسِيْتَاتُ الإِيْثِيْلِ عَلَى الكُوْلِيسْتَرُوْلِ وَستِيغَمَاسِتيرُوْلِ وَبَيْتًا سِيْتُوسِتيرُوْلِ وَبَرَاسِيْكَاستيرُوْلِ وَكَامُبستيرُوْلُ وَسِيْكُلُو أَرْتِيْنُوْلِ