Uji antioksidan dan identifikasi isolat steroid fraksi petroleum eter dan etil asetat hydrilla verticillata hasil kromatografi kolom gradien eluen

INDONESIA:

Hydrilla verticillata merupakan tumbuhan air yang terdapat pada perairan tergenang seperti sungai, waduk, dan juga danau. Hydrilla verticillata mengandung beberapa metabolit sekunder, salah satunya adalah steroid. Steroid memiliki berbagai potensi, salah satunya sebagai antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hasil isolasi senyawa steroid, aktivitas antioksidan isolat steroid Hydrilla verticillata hasil kromatografi kolom fraksi petroleum eter dan etil asetat terhadap DPPH, dan hasil karakterisasi isolat steroid menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Isolasi senyawa steroid dilakukan dengan 3 tahapan yaitu diekstrak dengan metode maserasi meggunakan pelarut metanol, dihidrolisis menggunakan HCl 2 N dan dipartisi menggunakan petroleum eter dan etil asetat. Hasil partisi diuji fitokimia menggunakan reagen Liebermann-Burchard. Setelah itu, pemisahan senyawa dilakukan dengan kromatografi kolom gradien eluen menggunakan pelarut n-heksana:etil asetat (19:1; 18:2; dan 17:3). Hasil pemisahan dimonitoring menggunakan KLTA dengan eluen n-heksana:etil asetat (17:3). Fraksi petroleum eter dan etil asetat serta isolat steroid hasil pemisahan kromatografi kolom diuji aktivitas antioksidannya menggunakan metode DPPH dengan parameter nilai EC50 dan diidentifikasi menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemisahan menggunakan kromatografi kolom fraksi petroleum eter dan etil asetat masing-masing menghasilkan beberapa fraksi isolat, satu diantaranya merupakan fraksi isolat steroid tunggal. Hasil EC50 fraksi petroleum eter, fraksi etil asetat, isolat petroleum eter, dan isolat etil asetat berturut-turut sebesar 94,66; 84,02; 9,231; 11,74 ppm. Hasil identifikasi UV-Vis fraksi petroleum eter menunjukkan serapan pada λmaks 204,1; 224,9; 405,9; dan 665,9 nm, fraksi etil asetat pada λmaks 204; 224; dan 662,1 nm, isolat steroid hasil kromatografi kolom fraksi petroleum eter pada λmaks 204 dan 224,9 nm, serta isolat steroid hasil kromatografi kolom fraksi etil asetat pada λmaks 205 dan 223 nm.

ENGLISH:

Hydrilla verticillata is an aquatic plant found in stagnant waters such as rivers, reservoirs, and lakes. Hydrilla verticillata contains several secondary metabolites, one of which is steroids. Steroids have various potentials, one of which is as an antioxidant. This study aims to determine the results of the isolation of steroid compounds, the antioxidant activity of the steroid isolate Hydrilla verticillata from column chromatography of the petroleum ether and ethyl acetate fractions against DPPH and the results of the characterization of steroid isolates by UV-Vis Spectrophotometer. Isolation of steroid compounds was carried out in 3 stages, namely extracted by maceration method using methanol as solvent, hydrolyzed using 2 N HCl and partitioned using petroleum ether and ethyl acetate. Partition results were tested for phytochemical using Liebermann-Burchard reagent. After that, the compound was separated by eluent gradient column chromatography using n-hexane:ethyl acetate (19:1; 18:2; and 17:3) as solvent. The results of the separation were monitored using ATLC with n-hexane:ethyl acetate as eluent (17:3). The petroleum ether and ethyl acetate fractions and steroid isolates from column chromatography separation were tested for their antioxidant activity using the DPPH method with the parameter value of EC50 and identified using UV-Vis Spectrophotometer. The results showed that the separation by column chromatography of petroleum ether and ethyl acetate fractions each produced several isolate fractions, one of which was a single steroid isolate fraction. The EC50 results of petroleum ether fraction, ethyl acetate fraction, petroleum ether isolate, and ethyl acetate isolate were 94.66; 84.02; 9.231; 11.74 ppm. The result of UV-Vis identification of petroleum ether fraction showed absorption at λmax 204.1; 224.9; 405.9; and 665.9 nm, ethyl acetate fraction at λmax 204; 224; and 662.1 nm, steroid isolates from petroleum ether fraction column chromatography at λmax 204 and 224.9 nm, and steroid isolates from ethyl acetate fraction column chromatography at λmax 205 and 223 nm.

ARABIC:

هِيْدِرِيْلَا فَرْتِيْتِشلَّاتَا (Hydrilla verticillata) هُوَ نَبَاتُ الْمِيَاهِ فِي الْمِيَاهِ الْغَارِقَةِ كَالنَّهْرِ، الْحَاوُوْزِ، وَ الْبُحَيْرَةِ. وَ يَشْمَلُ هِيْدِرِيْلَا فَرْتِيْتِشلَّاتَا (Hydrilla verticillata) مِنْ مَيْتَابَوْلِيتْ الْفَرْعِيِّ، أَحَدُهُ سَتَيْرَوْئِيتْ. وَ سَتَيْرَوْئِيتْ لَهُ الْقُوَّةُ، اِحْدَاهَا اَنْتِيْؤَوكْسِيْدَانْ. تَهْدِفُ هَذِهِ الدِّرَاسَةِ إِلىَ تَحْدِيدِ نَتَائِجِ عَزْلِ مَرْكَبَاتِ السَتَيْرَوْئِيتْ ، وَالنَّشَاطَ المُضَادِ لِلْأَكْسَدَةِ لِعَزْلِ السَتَيْرَوْئِيتْ (Hydrilla verticillata) مِنْ كُرُومَاتُوجَرَافِياَ الْعَمُودِ لِكُسُورِ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اِيْتِيرْ و اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ ضَدُ DPPH ، ونَتَائِجُ تُوصِيفُ اِيْسَوْلَاتْ سَتَيْرَوْئِيتْ بِاسْتِخْدَامِ مِقْيَاسِ الطَيْفِ الضَوْئِي UV-Vis . وَ يُعْمَلُ اِيْسَوْلَاسِيْ سَيْيَاوَا سَتَيْرَوْئِيتْ بِثَلَاثِ طُرُقٍ وَ هِيَ تُخْلَصُ بِالطَّرِيْقَةِ مَاسَيْرَاسِيْ تَسْتَخْدِمُ مَسِيْلَ مَيْطَانَولْ، وَ يُعْمَلُ هَيْدَرَوْلِيْسِيسْ بِاِسْتِخْدَامِ هَتشِئِ ٢ ن (HCl 2 N) وَ يُنْقَسَامُ بِاِسْتِخْدَامِ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اَيْتِيرْوَ اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ. وَ نَتِيْجَةُ الْاِنْقِسَامِ تُجَرَّبُ فِيْتَوْكِيْمِيَاءِ بِاِسْتِخْدَامِ لِيْئَيْبَيرْمَانْ-بُورْتَشردْ (Liebermann-Burchard). وَ بَعْدَ ذَلِكَ، تَفْرِيْقُ الْمُسْتَحْضَرِ يُعْمَلُ بِكَرَوْمَاتَوْكَرَافِيْ كَوْلَومْ كَرَادِاَينْ اِيْلَوْئَينْ يَسْتَخْدِمُ مَسِيْلَ ن- هَيكْسَانَا: اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ (١:١٩، ٢:١٨، و ١٧:٣). وَ نَتِيْجَةُ التَّفْرِيْقِ تُرَاقِبُ بِاِسْتِخْدَامِ ك ل ت ا (KLTA) باِيْلَوْئَينْ ن- هَيكْسَانَا: اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ (١٧:٣). وَ فَرَاكْسِيْ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اَيْتَيرْ وَ اِيْتِيلْ اَسَيْتَاتْ وَ اِيْسَوْلَاتْ سَتَيْرَوْئِيتْ وَ نَتِيْجَةُ تَفْرِيْقِ كَرَوْمَاتَوْكَرَافِيْ كَوْلَومْ تُجَرَّبُ بِعَمَلِيَّةِ اَنْتِيْؤَوكْسِيْدَانْ بِاِسْتِخْدَامِ طَرِيْقَةِ د د ف ه (DPPH) بِمُؤَشِّرَاتِ نَتِيْجَةِ EC50 وَ تَعَرُّفُ اِسْتِخْدَامِ سَفَيكْتَرَوْفَوْتَوْمَيْتَيرْ ا ف-فيس (UV-Vis). وَ يَسْتَخْدِمُ التَّفْرِيْقَ كَرَوْمَاتَوْكَرَافِيْ كَوْلَومْ فَرَاكْسِيْ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اِيْتِيرْ وَ اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ كُلُّهَا تَحْصُلُ بَعْضَ فَرَاكْسِيْ اِيْسَوْلَاتْ أَحَدُهُ فَرَاكْسِيْ اِيْسَوْلَاتْ سَتَيْرَوْئِيتْ الْوَحْدَةُ. وَ نَتِيْجَةُ فَرَاكْسِيْ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اِيْتِيرْ EC50 ، فَرَاكْسِيْ اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ، اِيْسَوْلَاتْ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اِيْتِيرْ، اِيْسَوْلَاتْ اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ مُتَوَالِيًا قَدْرَ ١١٩.٤ ؛ ٤٠.٣٧ ؛ ٩.٢٦٩ ؛ ١٤.٥٠جُزْءِفِيْ اَلْمِلْيُوْنَ. وَ نَتِيْجَةُ تَعَرُّفِ اُوْ فِيْ-فِيسْ فَرَاكْسِيْ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اِيْتِيرْتَدُلُّ سِيْرَافَانْ فِيْ λmaks ٢٠٤.١ ؛ ٢٢٤.٩ ؛ ٤٠٥.٩ ؛ و ٦٦٥.٩ نَانُوْمِتْر، فَرَاكْسِيْ اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ فِيْ λmaks ٢٠٤؛ ٢٢٤؛ و ٦٦٢.١ نَانُوْمِتْر ، اِيْسَوْلَاتْ سَتَيْرَوْئِيتْ نَتِيْجَةُ كَرَوْمَاتَوْكَرَافِيْ كَوْلَومْ فَرَاكْسِيْ فَتَرَوْلَيْؤُومْ اِيْتِيرْ فِيْ λmaks ٢٠٤ و ٢٢٤.٩ نَانُوْمِتْر ، وَ اِيْسَوْلَاتْ سَتَيْرَوْئِيتْ نَتِيْجَةُ كَرَوْمَاتَوْكَرَافِيْ كَوْلَومْ فَرَاكْسِيْ اِيْتِيلْ اَسِيْتَاتْ فِيْ λmaks ٢٠٥ و ٢٢٣ نَانُوْمِتْر.