Uji Toksisitas Isolat Steroid hasil KLTP Fraksi Etil Asetat dan Petroleum Eter Hydrilla verticillata.

مستخلص البحث

هيدريلا فيرتيجيلاتا (H. verticillata) عبارة عن نبات للمياه العذبة يوجد غالبًا في النظم البيئية للبحيرة. أظهرت العديد من الدراسات أن هيدريلا فيرتيجيلاتا (H. verticillata) لها نشاط كنبات طبي مثل مضادات الأكسدة ، ومضادات الجراثيم ، ومضادة للملاريا ، إلخ. هيدريلا فيرتيجيلاتا (H verticillata.) لها فوائد عديدة بسبب مركباتها الكيميائية النشطة ، أحدها مركب الستيرويد. تهدف هذه الدراسة إلى تحديد مستوى سمية عزل الستيرويد أسيتات الإيثيل وأجزاء الأثير البترولي من هيدريلا فيرتيجيلاتا (H. verticillata) و تحديدها باستخدام مقياس الطيف الضوئي تحويل الأشعة تحت الحمراء (FTIR). يتم الحصول على مركبات الستيرويد عن طريق الاستخلاص بالنقع باستخدام 96٪ ميثانول كمذيب. تم تحلل مستخلص الميثانول الذي تم الحصول عليه باستخدام HC1 2N ثم تم تقسيمه باستخدام نوعين مختلفين من المذيبات ، و هما أسيتات الإيثيل وإيثر البترول. تم اختبار نتائج التقسيم التي تم الحصول عليها من أجل الكيمياء النباتية وتم فصل مركبات الستيرويد باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحليلية (KLTA) و كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP). تم اختبار سمية عزلات الستيرويد ضد يرقات الجمبري أرتيميا سالينا ل (A. salina L). وتم التعرف عليها باستخدام مقياس الطيف الضوئي تحويل الأشعة تحت الحمراء (FTIR). أظهرت النتائج أن حاصل مستخلص الميثانول كان 6.495٪ ، وحاصل جزء أسيتات الإيثيل 50.094٪ ، وحاصل جزء الإيثر البترولي 48.550٪. أظهرت نتائج الاختبارات الكيميائية النباتية أن جزء أسيتات الإيثيل يحتوي على مركبات الفلافونويد والتريتربينويد والستيرويدات ، بينما احتوى جزء الأثير البترولي على ترايتيربينويدات وسترويدات. أظهرت نتائج فصل كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحليلية (KLTA) أن لطيف ن الهكسان: إيثيل الأسيتات (3:17) كان أفضل شطف لفصل المنشطات. فصل كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP) باستخدام أفضل شطف ينتج عزلة ستيرويد واحدة في جزء أسيتات الإيثيل و 4 عزلات ستيرويد في جزء إيثر البترول. أسفر اختبار السمية عن قيمة LC50 قدرها 14.7943 (عزل EA) ؛ 842353 (عزل PE1) ؛ 795194 (عزل PE2) ؛ 755361 (عزل PE3) ؛ و 6.34832 (عزل PE4) جزء في المليون. أشارت قيمة التركيز المميت النصفي إلى أن عزلات الستيرويد الخمس كانت ذات مستوى عالٍ جدًا من السمية ولديها القدرة على أن تكون مضادة للسرطان والأورام. أنتج تحديد العزلات الخمس باستخدام تحويل الأشعة تحت الحمراء (FTIR) نفس المجموعات ، و هي O-H ، و الثانوية C-OH ، و ديميتيل جوهرة (CH(CH3)2 ، و C=O استر ، و C-O-C ، و C=C غير اقتران.

ABSTRACT

Hydrilla verticillata is a freshwater plant that is often found in lake ecosystems. Some research shows H. verticillata has activity as a medicinal plant such as antioxidants, antibacterial, anti-malarial, etc. H. verticillata has many benefits due to its active chemical compounds, one of which is a steroid compound. This study aims to determine the level of toxicity of the steroid isolate ethyl acetate and petroleum ether fractions of H. verticillata and to identify using a FTIR spectrophotometer. Steroid compounds are obtained by maceration extraction using 96% methanol solvent. Then, the methanol extract was hydrolyzed with 2 N HCl and then partitioned with two variations of the solvent, ethyl acetate and petroleum ether. The partition results obtained were tested for phytochemistry and the steroid compounds were separated using ATLC and PTLC. The steroid isolates obtained were tested for their toxicity against Artemia salina L. shrimp larvae and identified using a FTIR spectrophotometer. The results showed that the yield of methanol extract was 6.495%, the yield of ethyl acetate fraction was 50.09%, and the yield of petroleum ether fraction was 48.55%. Phytochemical test results obtained showed that the ethyl acetate fraction contained flavonoids, triterpenoids, and steroids, while the petroleum ether fraction contained triterpenoids and steroids. The results of ATLC separation showed that n-hexane: ethyl acetate (17: 3) eluent was the best eluent for separating steroids. Separation TLC preparation using the best eluent produced 1 steroid isolate in the ethyl acetate fraction and 4 steroid isolates in the petroleum ether fraction. The toxicity test resulted in an LC50 value of 14,7943 (isolate EA); 8,42353 (isolate PE1); 7,95194 (isolate PE2); 7,55361 (isolate PE3); and 6,34832 (isolate PE4) ppm. The LC50 value obtained showed that the five steroid isolates had a very high level of toxicity and had the potential to be anticancer and anti-tumor. The identification of the five isolates using FTIR produced the same groups, namely O-H, secondary C-OH, geminal dimetil (CH(CH3)2), C=O ester, C-O-C, C=C non-conjugation.

ABSTRAK

Hydrilla verticillata merupakan tumbuhan air tawar yang sering ditemukan di ekosistem danau. Beberapa penelitian menunjukkan H. verticillata memiliki aktivitas sebagai tumbuhan obat seperti antioksidan, antibakteri, antimalaria, dll. H. verticillata memiliki banyak manfaat disebabkan kandungan senyawa kimia aktif yang terdapat di dalamnya, salah satunya adalah senyawa steroid. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat toksisitas isolat steroid fraksi etil asetat dan petroleum eter H. verticillata serta identifikasinya menggunakan spektrofotometer FTIR. Senyawa steroid diperoleh dengan cara ekstraksi maserasi menggunakan pelarut metanol 96%. Ekstrak metanol yang diperoleh dihidrolisis dengan HCl 2 N kemudian dipartisi dengan dua variasi pelarut yaitu etil asetat dan petroleum eter. Hasil partisi yang diperoleh diuji fitokimia dan dipisahkan senyawa steroidnya menggunakan KLTA dan KLTP. Isolat steroid yang diperoleh diuji toksisitasnya terhadap larva udang Artemia salina L. dan diidentifikasi menggunakan spektrofotometer FTIR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa rendemen ekstrak metanol diperoleh sebesar 6,495%, rendemen fraksi etil asetat sebesar 50,09%, dan rendemen fraksi petroleum eter sebesar 48,55%. Hasil uji fitokimia menunjukkan fraksi etil asetat mengandung flavonoid, triterpenoid, dan steroid, sedangkan fraksi petroleum eter mengandung triterpenoid dan steroid. Adapun hasil pemisahan KLTA menunjukkan eluen n-heksana:etil asetat (17:3) merupakan eluen terbaik untuk memisahkan steroid. Pemisahan KLTP menggunakan eluen terbaik menghasilkan 1 isolat steroid pada fraksi etil asetat dan 4 isolat steroid pada fraksi petroleum eter. Uji toksisitas menghasilkan nilai LC50 sebesar 14,7943 (isolat EA); 8,42353 (isolat PE1); 7,95194 (isolat PE2); 7,55361 (isolat PE3); dan 6,34832 (isolat PE4) ppm. Nilai LC50 tersebut menunjukkan kelima isolat steroid memiliki tingkat toksisitas yang sangat tinggi dan berpotensi sebagai antikanker dan antitumor. Identifikasi kelima isolat menggunakan FTIR menghasilkan gugus yang sama yaitu O-H, C-OH sekunder, geminal dimetil (CH(CH3)2), C=O ester, C-O-C, C=C nonkonjugasi.