Isolasi enzim bromelin dari buah nanas (Ananas Comosus (L.) Merr.) dengan metode presipitasi amonium sulfat

ABSTRAK:

Bromelin merupakan enzim proteolitik yang terdapat dalam buah nanas (Ananas comosus (L.) Merr.) dan berpotensi sebagai bahan aktif di berbagai bidang industri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar protein dan aktivitas enzim bromelin dari buah nanas asal Pemalang, Kediri, dan Blitar menggunakan metode presipitasi amonium sulfat pada berbagai konsentrasi. Proses isolasi dilakukan dengan menambahkan larutan amonium sulfat secara fraksinasi (20-40% (F1), 40-60% (F2), dan 60-80% (F3) ke dalam ekstrak kasar, dilanjutkan dengan proses sentrifugasi, dan pelarutan kembali
endapan dalam larutan buffer fosfat pH 7. Kadar protein ditentukan dengan metode Biuret sedangkan aktivitas enzim diukur menggunakan substrat kasein dan dianalisis menggunakan spektrofotometer UVVis. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa fraksi 40-60% merupakan fraksi paling optimal untuk ketiga daerah. Kadar protein tertinggi diperoleh pada fraksi 40-60% buah nanas asal Pemalang sebesar 0,532 mg/mL, sedangkan aktivitas enzim tertinggi terdapat pada fraksi 40-60% buah nanas asal Blitar sebesar
0,011 U/mL. Perbedaan nilai kadar protein dan aktivitas enzim antar daerah dipengaruhi oleh faktor geografis, seperti perbedaan jenis tanah, curah hujan, serta ketinggian tempat. Dengan demikian, variasi kondisi lingkungan dan konsentrasi amonium sulfat berpengaruh terhadap kualitas hasil isolasi enzim bromelin.

ABSTRACT:

Bromelain is a proteolytic enzyme found in pineapple fruit (Ananas comosus (L.) Merr.) and has potential as an active ingredient in various industries. This study aims to determine the protein content and bromelain enzyme activity of pineapple fruit from Pemalang, Kediri, and Blitar using the ammonium sulfate precipitation method at various concentrations. The isolation process was carried out by adding ammonium sulfate solution fractionally (20-40% (F1), 40-60% (F2), and 60-80% (F3) to the crude extract, followed by centrifugation and redissolution of the precipitate in a pH 7 phosphate buffer solution. The protein content was determined using the Biuret method, while enzyme activity was measured using casein substrate and analyzed using a UV-Vis spectrophotometer. The results of this study showed that the 40-60% fraction was the most optimal fraction for all three regions. The highest protein content was obtained in the 40-60% fraction of pineapple from Pemalang at 0.532 mg/mL, while the highest enzyme activity was found in the 40-60% fraction of pineapple from Blitar at 0.011 U/mL. The differences in protein content and enzyme activity between regions were influenced by geographical factors, such as differences in soil type, rainfall, and altitude. Thus, variations in environmental conditions and ammonium sulfate concentration affect the quality of bromelain enzyme isolation.

مستخلص البحث:

ن (.Ananas comosus (L.) Merr) بروميلين هو إنزيم بروتيني موجود في ثمرة األناناس
ونشاط إنزيم البروميلين في ثمار مادة فعالة في مختلف المجاالت الصناعية. تهدف هذه الدراسة إلى معرفة نسبة البروتين
دام طريقة ترسيب سلفات األمونيوم بتركيزات مختلفة. تم إجراء عملية القادمة من بيماالنغ وكيديري وبلتار باستخ األناناس
((إلى المستخلص 60 – 80 ( ٪ F3 (، و 20 - 40 ( ٪ F1 ،) 40 - 60 %( F2 ) العزل بإضافة محلول سلفات األمونيوم بالتجزئة
يد محتوى . تم تحد 7 محلول عازل فوسفات بدرجة حموضة لية الطرد المركزي وإعادة إذابة الراسب في الخام، تليها عم
البروتين باستخدام طريقة بيوظ، في حين تم قياس نشاط اإلنزيم باستخدام مادة الكازين وتحليله بواسطة مقياس الطيف فوق
ة. تم الحصول هي الشريحة األكثر مالءمة للمناطق الثالث ٪ 40 – 60 تُظهر نتائج هذا البحث أن الشريحة . المرئي - البنفسجي
، بينما كانت أعلى 0,532 mg/mL ٪ من أناناس محافظة بيماالنغ بمقدار 40 – 60 شريحة على أعلى محتوى للبروتين في
البروتين . يَتأثر االختالف في قيممحتوى 0.011 mL/U ٪ من أناناس محافظة بليتار بمقدار 40 – 60 نشاط لإلنزيم في شريحة
مية هطول األمطار، وارتفاع الموقع. وبالتالي، امل الجغرافية، مثل اختالف نوع التربة، وك ونشاط اإلنزيم بين المناطق بالعو
. فإن تنوع ظروف البيئة وتركيز سلفات األمونيوم يؤثران على جودة نواتج عزل إنزيم البروميلي