Evaluasi Keamanan Bakteri Leuconostoc mesenteroides Asal Isolat Tape Ketan Daun Jambu

ABSTRAK:

Tape ketan daun jambu merupakan pangan fermentasi tradisional yang berpotensi menjadi sumber bakteri asam laktat, salah satunya Leuconostoc mesenteroides. Meskipun bakteri asam laktat umumnya dikenal aman dan berpotensi sebagai probiotik maupun kultur starter, evaluasi keamanan tetap diperlukan sebelum isolat digunakan dalam aplikasi pangan. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi keamanan isolat L. mesenteroides asal tape ketan daun jambu berdasarkan aktivitas hemolisis, produksi gelatinase, dan profil resistensi antibiotik. Penelitian dilakukan secara laboratoris dengan pendekatan deskriptif kualitatif dan kuantitatif. Uji hemolisis dilakukan menggunakan media Blood Agar, uji gelatinase menggunakan media Pro Gelatine, sedangkan uji resistensi antibiotik dilakukan dengan metode Kirby-Bauer terhadap amoksisilin 20 μg, ampisilin 10 μg, dan cefixime 20 μg. Isolat yang menunjukkan indikasi resistensi dikonfirmasi lebih lanjut melalui uji Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat L. mesenteroides bersifat γ-hemolitik atau nonhemolitik karena tidak menghasilkan zona bening maupun perubahan warna di sekitar koloni. Hasil uji gelatinase menunjukkan reaksi negatif, ditandai dengan media gelatin yang tetap membeku setelah pendinginan. Pada uji resistensi antibiotik, isolat sensitif terhadap amoksisilin dengan zona hambat 35,31 mm dan ampisilin 34,39 mm, tetapi resisten terhadap cefixime dengan zona hambat 4,79 mm. Uji MIC terhadap cefixime menunjukkan penghambatan pada konsentrasi 4–256 μg/mL, dengan inhibisi tertinggi 51,423% pada konsentrasi 256 μg/mL. Berdasarkan hasil tersebut, isolat L. mesenteroides memiliki karakter nonhemolitik dan gelatinase negatif, tetapi masih memerlukan perhatian terhadap resistensi cefixime sebelum dikembangkan sebagai kandidat probiotik atau kultur starter pangan fermentasi.

ABSTRACT:

Guava leaf glutinous rice tape is a traditional fermented food that has the potential to serve as a source of lactic acid bacteria, one of which is Leuconostoc mesenteroides. Although lactic acid bacteria are generally recognized as safe and have potential applications as probiotics and starter cultures, safety evaluation is still necessary before the isolates can be used in food applications. This study aimed to evaluate the safety of L. mesenteroides isolates obtained from guava leaf glutinous rice tape based on hemolytic activity, gelatinase production, and antibiotic resistance profiles. The study was conducted in the laboratory using descriptive qualitative and quantitative approaches. Hemolysis testing was performed using Blood Agar medium, gelatinase testing was carried out using Pro Gelatine medium, while antibiotic resistance testing was conducted using the Kirby–Bauer method against amoxicillin 20 μg, ampicillin 10 μg, and cefixime 20 μg. Isolates showing indications of resistance were further confirmed through the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) test. The results showed that the L. mesenteroides isolate was γ-hemolytic or non- hemolytic, as indicated by the absence of clear zones or color changes around the colonies. The gelatinase test results were negative, indicated by the gelatin medium remaining solid after cooling. In the antibiotic resistance test, the isolate was sensitive to amoxicillin with an inhibition zone of 35.31 mm and ampicillin with an inhibition zone of 34.39 mm, but resistant to cefixime with an inhibition zone of 4.79 mm. The MIC test for cefixime showed inhibition at concentrations ranging from 4–256 μg/mL, with the highest inhibition of 51.423% observed at a concentration of 256 μg/mL. Based on these findings, the L. mesenteroides isolate exhibited non-hemolytic and gelatinase-negative characteristics; however, attention is still required regarding its resistance to cefixime before further development as a probiotic candidate or starter culture for fermented foods

مستخلص البحث:

عد ُّ أرز الدبق املخمر أبوراق اجلوافة غذاء ً خممّرًا تقليد Leuconostoc mesenteroides. وعلى الرغم من أن بكتري ًي محض الالكتيك تُعرف عمومًا أبهنا آمنة ولديها إمكانيات كمعززات حيوية أو مزرعة ابدئة، إال أن تقييم األمن يظل ضرور ًيً قبل استخدام العزالت يف التطبيقات الغذائية. هدف هذا البحث إىل تقييم أمن عزلةًيبكتري Leuconostoc mesenteroidesمن أرز الدبق املخمر أبوراق اجلوافةبناء ً على نشاط التحلّل كمي. مت اختبارالدموي، وإنتاج اجليالتيناز، وملف املقاومة للمضادات احليوية. أُجريت الدراسة خمربًيا ابستخدام منهج وصفي نوعي و التحلّل الدموي ابستخدام وسط أجار الدم، واختبار اجليالتيناز ابستخدام وسط برو جيالتني، بينما أُجري اختبار مقاومة املضادات كرييب احليوية ابستخدام طريقة-كيزكسيليلني برتابور على أمو20ميكروغرام، وأمبيسيلني10ميكروغرام، وسيفيكسيم20ميكروغرام. كيز املثبط األدىنمت أتكيد العزالت اليت أظهرت مؤشرات مقاومة بشكل إضايف من خالل اختبار الرت (MIC).أظهرت نتائج البحث أن عزلةًيبكتري Leuconostoc mesenteroidesتتميز خباصية التحلل الدمويγأو عدم التحلل الدموي لعدم تكوينها منطقة شفافة أو تغيري اللون حول املستعمرة.أظهرت نتائج اختبار اجليالتيناز تفاعال ً سلبيًا، حيث بقي الوسط اجليالتيين متجمدًا بعد كسيسيلني مع منطقة تثبيط مبقدارالتربيد. يف اختبار مقاومة املضادات احليوية، كان العزل حساسًا لألمو35.31مم واألمبيسلني مبقدار34.39كان مقاومًا للسيفيكسيم مع منطقة مم، ولكنهتثبيط مبقدار4.79كيز املثبط األدىنمم. أظهر اختبار الرت (MIC) كيزات ترتاوح بنيللسيفيكسيم تثبيطًا عند تر4–256ميكروغرام/مل، مع أعلى تثبيط بنسبة51.423كيز٪ عند تر256 ميكروغرام/مل. بناء ً على هذه النتائج، متتلك هذه العزلة خصائص غري حمللة للدم وسلبية للجيالتيناز، لكنها ما زالت تتطلب االنتباه ملقاومة السيفيكسيم قبل تطويرها كمرشح معززات حيوية أو مزرعة ابدئة لألطعمة املخمرة