Metabolite profiling ekstrak buah kesemek (Diospyros kaki L.) dari lokasi tumbuh yang berbeda dengan metode UPLC-MS/MS serta identifikasi senyawa potensial sebagai antikanker kolon melalui analisis multivariat

INDONESIA:

Buah kesemek (Diospyros kaki L.) merupakan tanaman buah subtropis yang tergolong langka di Indonesia yang berpotensi dikembangkan menjadi fitofarmaka. Perbedaan lokasi pertumbuhan diduga menyebabkan variasi kandungan senyawa metabolit yang mempengaruhi perbedaan aktivitas farmakologis. Studi ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan profil metabolit serta mengidentifikasi senyawa yang berpotensi memiliki aktivitas antikanker kolon pada buah kesemek yang diperoleh dari daerah Tamansatriyan, Jawa Timur; Magetan, Jawa Timur; Batu, Jawa Timur; Wonosobo, Jawa Tengah; dan Boyolali, Jawa Tengah. Ekstraksi sampel dilakukan dengan metode Ultrasonic Assisted Extraction (UAE) dengan pelarut etanol 96%. Analisis kandungan metabolit dilakukan menggunakan UPLC-QToF-MS/MS dengan kolom fase diam C18 (Okta Decyl Silica), campuran fase gerak air/asam format 99,9/0,1 (v/v) dan asetonitril/asam format 99,9/0,1 (v/v). Uji sitotoksisitas pada cell line WiDr menggunakan metode MTT Assay, kemudian dilanjutkan dengan analisis multivariat. Hasil analisis PCA menunjukkan adanya pemisahan yang jelas antar sampel buah kesemek dari berbagai lokasi tumbuh. Tiga metabolit yang diduga berperan dalam pemisahan tersebut adalah 8-asetoksi-4-metoksipinoresinol, gerberinol, dan 4-hidroksi-5,7-dimetoksiflavan. Sementara itu, analisis HCA menunjukkan bahwa sampel buah kesemek dari Batu dan Boyolali memiliki kemiripan profil metabolit. Hasil analisis HCA juga menunjukkan bahwa pada dataran yang lebih rendah, kandungan senyawanya lebih bervariasi. Hasil uji sitotoksisitas menunjukkan bahwa seluruh sampel buah kesemek diprediksi memiliki aktivitas antikanker kolon yang lemah.

ENGLISH:

The persimmon fruit (Diospyros kaki L.) is a subtropical fruit plant that is classified as rare in Indonesia and has the potential to be developed into a phytopharmaceutical. Differences in growing locations are presumed to cause variations in the content of metabolites, which influence differences in pharmacological activity. This study aims to determine differences in metabolite profiles and to identify compounds with potential anti-colonic cancer activity in persimmons obtained from Tamansatriyan, East Java; Magetan, East Java; Batu, East Java; Wonosobo, Central Java; and Boyolali, Central Java. Samples were extracted using the Ultrasonic-Assisted Extraction (UAE) method with 96% ethanol solvent. Metabolite analysis was performed using UPLC-QToF-MS/MS with a C18 (Octadecyl Silica) stationary phase column, using a mobile phase mixture of water/formic acid 99.9/0.1 (v/v) and acetonitrile/formic acid 99.9/0.1 (v/v). The cytotoxicity test on the WiDr cell line was performed using the MTT Assay, followed by multivariate analysis. The results of the PCA analysis showed a clear separation between persimmon fruit samples from different growing locations. Three metabolites suspected of playing a role in this separation are 8-acetoxy-4-methoxypinoresinol, gerberinol, and 4-hydroxy-5,7-dimethoxyflavan. Meanwhile, HCA analysis showed that persimmon fruit samples from Batu and Boyolali exhibited similar metabolite profiles. The HCA analysis also revealed that, at lower altitudes, the composition of the compounds was more varied. Cytotoxicity test results indicated that all persimmon fruit samples were predicted to possess weak anti-colonic cancer activity.

ARABIC:

تعتبر فاكهة الكاكي (Diospyros kaki L) نباتًا شبه استوائي يندر وجوده في إندونيسيا، وله إمكانية التطوير ليصبح دواءً نباتيًا. ويُعتقد أن اختلاف مواقع النمو يتسبب في تباين محتوى المركبات الأيضية، مما يؤثر على اختلاف النشاط الدوائي. هذا البحث يهدف إلى معرفة الاختلافات في ملامح المستقلبات وكذلك تحديد المركبات التي قد يكون لها نشاط مضاد لسرطان القولون في فاكهة الكاكي التي تم الحصول عليها من مناطق تامانساتريان، جاوة الشرقية؛ ماغيتان، جاوة الشرقية؛ باتو، جاوة الشرقية؛ وونوسوبو، جاوة الوسطى؛ وبويولالي ، جاوة الوسطى. تم استخلاص العينات باستخدام طريقة الاستخلاص بمساعدة الموجات فوق الصوتية (UAE) بمذيب الإيثانول 96٪. تم تحليل محتوى المستقلبات باستخدام UPLC-QToF-MS/MS مع عمود طور ثابت C18 (Okta Decyl Silica)، ومزيج طور متحرك من الماء/حمض الفورميك بنسبة 99,9/0,1 (حجم/حجم) والأسيتونيتريل/حمض الفورميك بنسبة 99,9/0,1 (حجم/حجم). تم إجراء اختبار السمية الخلوية على خط الخلايا WiDr باستخدام طريقة MTT Assay، ثم تبع ذلك تحليل متعدد المتغيرات. أظهرت نتائج تحليل PCA وجود فصل واضح بين عينات ثمار الكاكي من مختلف مواقع النمو. فيُعتقد أن المستقلبات الثلاثة تلعب دورًا في هذا الفصل هي 8-أسيتوكسي-4-ميثوكسيبينوريسينول، وجربرينول، و4-هيدروكسي-5,7-ديميثوكسيفلافان. بينما أظهر تحليل HCA أن عينات الكاكي من باتو وبويولالي تتشابه في ملامح مركباتها الأيضية. كما أظهرت نتائج تحليل HCA أن محتوى المركبات في السهول المنخفضة أكثر تنوعًا. وأظهرت نتائج اختبار السمية الخلوية أن جميع عينات الكاكي يُتوقع أن تتمتع بنشاط ضعيف في مكافحة سرطان القولون.