Imunomodulator kopi hijau Robusta (Coffea Canephora) terhadap Viabilitas Makrofag dan sel Epitel Usus serta produksi TNF-α setelah induksi LPS In Vitro

ABSTRAK

Etiologi penyakit radang usus (Inflammatory Bowel Disease/ IBD) masih belum sepenuhnya dipahami. Meskipun demikian, interaksi sistem kekebalan tubuh dengan mikrobioma saluran usus pada individu yang rentan secara genetik memainkan peran penting dalam patogenesis IBD. Penelitian dilakukan untuk mengivestigasi potensi sifat imunomodulator dan anti-inflamasi dari kopi hijau robusta (Coffea canephora) dalam memperbaiki kondisi peradangan kronik menggunakan model eksperimental in vitro. Sel makrofag dan sel epitel usus dari mencit (Mus musculus) diinduksi inflamasi dengan lipopolisakarida (LPS) dan kemudian diberi perlakuan dengan ekstrak kopi hijau robusta. Viabilitas sel makrofag dan sel epitel usus diukur dengan MTT Assay, serta ekspresi TNF-α pada makrofag diukur dengan Flow citometry. Data viabilitas sel dianalasis statistika dengan ANOVA, sedangkan produsksi TNF-α pada makrofag dianalisis dengan uji Independent Sampel T Tes. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kopi hijau robusta secara signifikan meningkatkan viabilitas sel makrofag dan sel epitel usus dibandingkan dengan kontrol negatif yang diinduksi LPS, serta secara efektif menekan ekspresi sitokin proinflamasi TNF-α pada makrofag. Kesimpulannya, kopi hijau robusta menunjukkan efek imunomodulator dan anti-inflamasi yang berkontribusi terhadap perbaikan inflamasi pada sel makrofag dan sel epitel usus serta menunjukkan potensi yang menjanjikan digunakan sebagai agen terapeutik dalam pengobatan penyakit radang usus.

ABSTRACT

The etiology of Inflammatory Bowel Disease (IBD) is not yet fully understood. However, the interaction between the immune system and the gut microbiome in genetically susceptible individuals plays a crucial role in the pathogenesis of IBD. This study aims to investigate the potential immunomodulatory and anti-inflammatory properties of green robusta coffee (Coffea canephora) in ameliorating chronic inflammatory conditions using an in vitro experimental model. Macrophage and intestinal epithelial cells from mice (Mus musculus) were induced with lipopolysaccharide (LPS) to simulate inflammation and subsequently treated with green robusta coffee extract. Cell viability was measured using the MTT Assay, and TNF-α expression in macrophages was assessed by Flow Cytometry. Cell viability data were statistically analyzed using ANOVA, while TNF-α production in macrophages was analyzed using the Independent Sample T-Test. The results showed that green robusta coffee extract significantly increased the viability of macrophages and intestinal epithelial cells compared to the LPS-induced negative control and effectively suppressed the expression of the pro-inflammatory cytokine TNF-α in macrophages. In conclusion, green robusta coffee demonstrated immunomodulatory and anti-inflammatory effects that contribute to the improvement of inflammation in macrophages and intestinal epithelial cells and show promising potential as a therapeutic agent in the treatment of IBD.

مستخلص البحث

لا تزال أسباب مرض التهاب الأمعاء (Inflammatory Bowel Disease/IBD) غير مفهومة بشكل كامل. ومع ذلك، فإن تفاعل الجهاز المناعي مع ميكروبيوم الأمعاء في الأفراد المعرضين جينياً يلعب دوراً مهماً في التسبب في IBD. تهدف هذه الدراسة إلى التحقيق في الخصائص المناعية والمضادة للالتهابات للقهوة الخضراء روبوستا (Coffea canephora) في تحسين حالات الالتهاب المزمن باستخدام نموذج تجريبي في المختبر. تم تحفيز الخلايا البلعمية والخلايا الظهارية المعوية من الفئران (Mus musculus) بالليبوبوليساكاريد (LPS) لمحاكاة الالتهاب ومن ثم تمت معالجتها بمستخلص القهوة الخضراء روبوستا. تم قياس حيوية الخلايا باستخدام اختبار MTT، وتم تقييم تعبير TNF-α في الخلايا البلعمية باستخدام قياس التدفق الخلوي. تم تحليل بيانات حيوية الخلايا إحصائيًا باستخدام ANOVA، بينما تم تحليل إنتاج TNF-α في الخلايا البلعمية باستخدام اختبار T للعينة المستقلة. أظهرت النتائج أن مستخلص القهوة الخضراء روبوستا زاد بشكل كبير من حيوية الخلايا البلعمية والخلايا الظهارية المعوية مقارنةً بالتحكم السلبي المحفز بـLPS، وكبح بشكل فعال تعبير السيتوكين المؤيد للالتهابات TNF-α في الخلايا البلعمية. في الختام، أظهرت القهوة الخضراء روبوستا تأثيرات مناعية ومضادة للالتهابات تساهم في تحسين الالتهاب في الخلايا البلعمية والخلايا الظهارية المعوية وتظهر إمكانات واعدة كعامل علاجي في علاج IBD.