#NOPUBLISH 23/7/2024# Uji toksisitas ekstrak etanol Hydrilla verticillata (L. f) Royle terelisitasi variasi konsentrasi logam berat timbal (Pb) menggunakan metode UAE (ultrasonic assisted extraction)

ABSTRAK:

Hydrilla verticillata merupakan tumbuhan air yang banyak mengandung senyawa metabolit sekunder sehingga memiliki bioaktivitas tinggi. Peningkatan bioaktivitas senyawa aktif Hydrilla verticillata dapat dilakukan dengan bantuan elisitor sehingga tingkat toksisitasnya meningkat. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui tingkat toksisitas ekstrak Hydrilla verticillata yang terelisitasi variasi konsentrasi elisitor beserta dengan identifikasi peningkatan senyawa aktifnya. Preparasi biomassanya melalui aklimatisasi selama 14 hari, kemudian dielisitasi dengan logam Pb dalam akuademin (1:30) pada konsentrasi (0, 25, 30, 35, 40, 45, dan 50) ppm selama 7 hari. Biomassa hasil elisitasi diekstrak menggunakan metode UAE selama 40 menit pada suhu ≤ 40oC dengan pelarut etanol food grade. Ekstrak yang diperoleh selanjutnya diuji tingkat toksisitasnya menggunakan metode BSLT dengan parameter pengujian adalah nilai LC50. Identifikasi senyawa ekstrak dilakukan dengan uji fitokimia, UV-Vis, dan FT-IR.

Uji toksisitas terbaik pada konsentrasi elisitasi 25 ppm dengan LC50 (365,192 ppm). Uji reagen fitokimia mengidentifikasi bahwa ekstrak positif mengandung alkaloid, flavonoid, dan steroid. Identifikasi UV-Vis menunjukkan ekstrak elisitasi 25 ppm diperoleh λmaks terbanyak dengan absorbansi yang tinggi, mengindikasikan adanya ikatan rangkap tidak terkonjugasi daerah (200 nm) dan ikatan rangkap terkonjugasi daerah (400 nm) menandakan transisi π - π*. Serapan daerah 500-600 nm menunjukkan transisi η - π* (gugus kromofor yang berikatan dengan auksokrom). Hasil identifikasi FT-IR menunjukkan perbedaan antara ekstrak hasil elisitasi 25 ppm dan kontrol (0 ppm). Ekstrak elisitasi 25 ppm memiliki lebih banyak bilangan gelombang maksimum dengan %transmitan kecil (serapan lebih kuat). Bilangan gelombang ini menunjukkan adanya gugus fungsi seperti O-H stretching fenolik, Csp2-H stretching, Csp3-H stretching, asymmetric C=C=C, C=C stretching terkonjugasi, C=C stretching tidak terkonjugasi, C-O stretching (ester), C=O stretching, C-H out-of-plane bending, C=N (CH-N) stretching, N=C=O stretching (isocyanate) dan Amida IV (N-H).

ABSTRACT:

Hydrilla verticillata is an aquatic plant that contains many secondary metabolite compounds that have high bioactivity. Increasing the bioactivity of active compounds of Hydrilla verticillata can be done with the help of elicitors so that the level of toxicity increases. The purpose of this study was to determine the toxicity level of Hydrilla verticillata extracts that were elicited by variations in elicitor concentration along with the identification of increased active compounds. Biomass preparation was through acclimatization for 14 days, then elicited with Pb metal in aquaculture (1:30) at concentrations of (0, 25, 30, 35, 40, 45, and 50) ppm for 7 days. The elicited biomass was extracted using the UAE method for 40 minutes at ≤ 40oC with food grade ethanol solvent. The extract obtained was then tested for toxicity using the BSLT method with the test parameter being the LC50 value. Identification of extract compounds was carried out by phytochemical, UV-Vis, and FT-IR tests.

The best toxicity test at 25 ppm elicitation concentration with LC50 (365.192 ppm). Phytochemical reagent tests identified that the extract was positive for alkaloids, flavonoids, and steroids. UV-Vis identification showed the 25 ppm elicitation extract obtained the most λmax with high absorbance, indicating the presence of unconjugated double bonds in the region (200 nm) and conjugated double bonds in the region (400 nm) indicating the π - π* transition. The absorption of the 500-600 nm region indicates the η - π* transition (chromophore group that binds to auxochrome). FT-IR identification results showed differences between the 25 ppm elicited extract and the control (0 ppm). The 25 ppm elicited extract has more maximum wave numbers with small % transmittance (stronger absorption). These wave numbers indicate the presence of functional groups such as phenolic O-H stretching, Csp2-H stretching, Csp3-H stretching, asymmetric C=C=C, conjugated C=C stretching, unconjugated C=C stretching, C-O stretching (esters), C=O stretching, C-H out-of-plane bending, C=N (CH-N) stretching, N=C=O stretching (isocyanate) and Amide IV (N-H).

مستخلص البحث :

هيدريلا فيرتيسيلات هو نبات مائي يحتوي على الكثير من مركبات الأيض الثانوية لذلك لديه نشاط حيوي عالي. يمكن إجراء الزيادة في النشاط الحيوي للمركب النشط هيدريلا فيرتيسيلاتا بمساعدة المستنبط بحيث يزيد مستوى السمية. كان الغرض من هذه الدراسة هو تحديد مستوى سمية مستخلص هيدريلا فيرتيسيلاتا الذي تم استنباطه من خلال الاختلافات في تركيزات المحفز جنبا إلى جنب مع تحديد زيادة في مركباته النشطة. تم تحضير الكتلة الحيوية من خلال التأقلم لمدة ۱٤ يوما ، ثم تم تحللها بمعدن الرصاص في أكواديرم (1:30) بتركيزات (۰ ، ٢۰ ، ٣۰ ، ٣۵ ، ٤۰ ، ٤۵ ، و ۵۰) ppm لمدة ۷ أيام. تم استخلاص الكتلة الحيوية من الحذف باستخدام طريقة الإمارات العربية المتحدة لمدة ٤٠ دقيقة عند درجة حرارة ≤ ٤٠ درجة مئوية مع مذيب الإيثانول الغذائي. ثم تم اختبار المستخلص المستخرج الذي تم الحصول عليه بحثا عن السمية باستخدام طريقة BSLT مع معلمة الاختبار هي قيمة LC۵٠. تم تحديد مركبات المستخلص عن طريق اختبارات الكيمياء النباتية والأشعة فوق البنفسجية واختبارات FT-IR.

أفاضل اختبار سمية عند تركيز استنباط ٢۵ جزء في المليون مع LC۵٠ (365.192 ppm). حددت اختبارات الكاشف الكيميائي النباتي أن المستخلص الإيجابي يحتوي على قلويدات وفلافونويد ومنشطات. أظهر تحديد الأشعة المرئية وفوق البنفسجية أن مستخلص الإزالة 25 ppm حصل على أكبر قدر من λmax مع امتصاص عالي، مما يشير إلى وجود روابط مزدوجة إقليمية غير مقترنة (200 نانومتر) وروابط مزدوجة مترافقة إقليمية (400 نانومتر) تشير إلى انتقال π - π *. يظهر امتصاص المنطقة من 500-600 نانومتر انتقالا من η - π * (مجموعات كروموفور مرتبطة بالأوكسوكرومات). أظهرت نتائج تحديد FT-IR فرقا بين النتيجة المستخرجة من الحذف 25 ppm والتحكم (0 ppm). يحتوي مستخلص الحذف 25 ppm على المزيد من أرقام الموجات القصوى مع نفاذية صغيرة (امتصاص أقوى). يشير رقم الموجة هذا إلى وجود مجموعات وظيفية مثل تمدد O-H الفينولي، وتمدد Csp2-H، وتمدد Csp3-H، وتمدد C = C = C غير متماثل، وتمدد C = C، وتمدد C = C، وتمدد C = C، وتمدد C-O (استر)، وتمدد C = O، وانحناء C-H خارج المستوى، وتمدد C = N (CH-N)، و N = C = O تمدد (إيزوسيانات) و Amide IV (N-H).