#NOPUBLISH 25/7/2024# Isolasi dan identifikasi bakteri penghasil enzim ligninase dari limbah cair dan limbah sludge pabrik kertas di kabupaten Mojokerto, Jawa Timur

INDONESIA:

Penelitian ini dilakukan untuk mengidentifikasi bakteri ligninolitik dari limbah cair dan limbah sludge pabrik kertas yang mampu memproduksi enzim ligninase dan menguji aktivitas enzim yang dihasilkan. Metode yang digunakan meliputi isolasi menggunakan media selektif lignin-mineral salt (L-MSM), uji aktivitas enzim secara kualitatif dengan mengukur indeks ligninolitik melalui diameter zona bening yang terbentuk pada media mineral salt dengan pewarnaan methylene blue, secara kuantitatif dengan menghitung aktivitas enzim lignin peroksidase (LiP) melalui nilai absorbansi pada media katekol menggunakan spektrofotometer UV-Vis, dan identifikasi isolat. Identifikasi isolat bakteri dilakukan secara makroskopik, mikroskopik, serta pendekatan molekuler menggunakan gen 16S rRNA primer forward 27F (5’-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3’), dan primer reverse 1492R (5’-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3’). Hasil penelitian diperoleh 4 isolat bakteri ligninolitik, yaitu LCMB-01, LCMB-02, LCMS, dan LSMS. Isolat LSMS memiliki potensi paling tinggi dalam menghasilkan enzim ligninase dengan indeks ligninolitik sebesar 1,07 mm dan aktivitas enzim LiP sebesar 8,113 U/ml. Hasil identifikasi molekuler menunjukkan bahwa isolat LSMS memiliki kemiripan dengan spesies Klebsiella pneumoniae strain JCM1662 dengan persentase kemiripan 98,27%.

INGGRIS:

This study was conducted to identify ligninolytic bacteria from liquid waste and paper mill sludge waste capable of producing ligninase enzyme and test the enzyme activity produced. The methods used include isolation using selective lignin-mineral salt medium (L-MSM), qualitative enzyme activity test by measuring the ligninolytic index through the diameter of the clear zone formed on mineral salt media with methylene blue staining, quantitatively by calculating the enzyme activity of lignin peroxidase (LiP) through the absorbance value on catechol media using a UV-Vis spectrophotometer, and identification of isolates. Identification of bacterial isolates was done macroscopically, microscopically, and molecularly using 16S rRNA gene forward primer 27F (5'-AGAGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'), and reverse primer 1492R (5'-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3'). The results obtained 4 isolates of ligninolytic bacteria, namely LCMB-01, LCMB-02, LCMS, and LSMS. LSMS isolate has the highest potential in producing ligninase enzyme with ligninolytic index of 1.07 mm and LiP enzyme activity of 8.113 U/ml. Molecular identification results showed that LSMS isolates were similar to Klebsiella pneumoniae strain JCM1662 with a similarity percentage of 98.27%.

ARAB:

أجريت هذه الدراسة لتحديد البكتيريا المحللة للجنينات من النفايات sludge ونفايات حمأة مصانع الورق القادرة على إنتاج إنزيمات اللجنيناز واختبار نشاط الإنزيمات المنتجة. تشمل الطرق المستخدمة عزل البكتيريا باستخدام الوسائط الانتقائية اللجنين-mineral salt (L-MSM)، واختبار نشاط الإنزيم النوعي عن طريق قياس مؤشر تحلل اللجنين من خلال قطر المنطقة الصافية المتكونة على وسط mineral salt مع تلطيخ methylene blue، كميا عن طريق حساب نشاط إنزيم اللجنين بيروكسيديز (LiP) من خلال قيمة الامتصاص على وسط الكاتيكول باستخدام مقياس الطيف الضوئي لل UV-Vis، وتحديد العزل. تم تحديد العزلات البكتيرية من خلال العيانية والمجهرية، وكذلك الأساليب الجزيئية باستخدام جين 16S rRNA forward 27F (5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3')، والتمهيدي العكسي 1492R (5'-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3'). حصلت نتائج الدراسة على 4 عزلات بكتيرية محللة للجنين، وهي LCMB-01 و LCMB-02 و LCMS و LSMS. يحتوي عزل LSMS على أعلى إمكانات في إنتاج إنزيمات ligninase بمؤشر تحلل اللجنين 1.07 مم ونشاط إنزيم LiP يبلغ 8.113 وحدة / مل. أظهرت نتائج التحديد الجزيئي أن عزل LSMS له أوجه تشابه مع سلالة Klebsiella pneumoniae JCM1662 الأنواع بنسبة تشابه تبلغ 98.27٪.