#NOPUBLISH 30/7/2024# Eksplorasi dan identifikasi molekuler jamur mikroskopis terestrial sebagai penghasil enzim kitinase dari taman hutan raya (Tahura) Raden Soerjo Malang

ABSTRAK:

Kitosan adalah biopolimer linier turunan dari unit β(1-4)-2-amino-2-deoksi-D-glukosamin (GlcN). Kitin dan kitosan merupakan polisakarida yang mengandung struktur nitrogen yang memiliki fungsi struktural bagi sel jamur. Kandungan kitin pada dinding sel jamur mikroskopis dapat bervariasi sesuai dengan fase morfologi jamur dan lingkungan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi jamur mikroskopis dari Taman Hutan Raya Raden Soerjo sebagai penghasil enzim kitinase dan untuk mengetahui karakteristik jamur mikroskopis secara morfologi dan molekuler berdasarkan gen ITS ribosomal. Sampel tanah dari Taman Hutan Raya Raden Soerjo Malang disiapkan untuk isolasi jamur. Jamur penghasil enzim kitinase dari isolat ditentukan dari keberadaan zona kuning pada media kitin agar dengan penambahan bromokresol ungu sebagai indikator perubahan warna. Identifikasi jamur pada tingkat genus dilakukan dengan mengamati karakter makroskopik isolat seperti warna koloni, bentuk koloni, tekstur permukaan atas, tekstur permukaan bawah, serta karakter mikroskopis isolat seperti hifa, konidia dan susunan spora. Identifikasi tingkat spesies dilakukan secara molekuler menggunakan primer universal ITS1 dan ITS4. Hasil seleksi keberadaan zona kuning berhasil menyeleksi tujuh isolat yang memiliki potensi sebagai sumber penghasil enzim kitinase yaitu SC2, SC6, SC8, SC12, SC13, SC14, dan SC23. Identifikasi secara morfologi dan hasil molekuler menunjukkan bahwa isolat SC2 memiliki hasil yang sama dengan Metarhizium guizhouense, isolat SC6 memiliki hasil yang sama dengan Penicillium abidjanum, SC8 memiliki hasil yang sama dengan Penicillium daleae, SC12 memiliki hasil yang sama dengan Aspergillus tubingensis, SC13 memiliki hasil yang sama dengan Penicillium citrinum, SC14 memiliki hasil yang sama dengan Penicillium virgatum dan SC23 memiliki hasil yang sama dengan Furcasterigmium furcatum. Penelitian ini adalah upaya awal untuk mengetahui jamur apa yang paling memiliki potensi sebagai penghasil enzim kitinase.

ABSTRACT:

Chitosan is a linear biopolymer derived from β(1-4)-2-amino-2-deoxy-Dglucosamine (GlcN) units. Chitin and chitosan are polysaccharides containingnitrogen structures which have a structural function for fungal cells. The chitincontent in the cell walls of microscopic fungi can vary according to themorphological phase of the fungus and the environment. The aim of this researchis to determine the potential of microscopic fungi from Raden Soerjo Forest Parkas producers of chitinase enzymes and to determine the morphological andmolecular characteristics of microscopic fungi based on ribosomal ITS genes. Soilsamples from Raden Soerjo Forest Park Malang were prepared for fungal isolation.The fungus producing the chitinase enzyme from the isolate was determined fromthe presence of a clear zone on the chitin agar medium with the addition of purplebromocresol as an indicator of color change. Identification of fungi at the genuslevel is carried out by observing macroscopic characters of isolates such as colonycolor, colony shape, upper surface texture, lower surface texture, as well asmicroscopic characteristics of isolates such as hyphae, conidia and sporearrangement. Species level identification was carried out molecularly usinguniversal primers ITS1 and ITS4. The results of the selection for the presence of aclear zone succeeded in selecting seven isolates that had the potential to producechitinase enzymes, namely SC2, SC6, SC8, SC12, SC13, SC14, and SC23.Morphological and molecular identification showed that the SC2 isolate was similartoMetarhizium guizhouense, isolate SC6 has similarities toPenicillium abidjanum,SC8 has similarities toPenicillium daleae, SC12 is similar toAspergillustubingensis, SC13 is similar toPenicillium citrinum, SC14 is similar toPenicilliumvirgatum and SC23 is similar toFurcasterigmium furcatum. This research is aninitial effort to find out which fungi have the most potential as producers of thechitinase enzyme..

مستخلص البحث:

خالصةالوحدات من مشتق خطي حيوي بوليمر هو الشيتوزانβ(1-4)-2-أمينو-2-ديوكسي-د-جلوكوزامين)GlcN.(الكيتين والشيتوزان عبارة عنعديدات السكاريد التي تحتوي على هياكل نيتروجينية لها وظيفةهيكلية للخاليا الفطرية. يمكن أن يختلف محتوى الكيتين في جدران خاليا الفطريات المجهرية وفقًا للمرحلةالمورفولوجية للفطر والبيئة. الهدف من هذا البحث هو تحديد إمكانات الفطريات المجهرية من منتزه غابةرادين سويرجو كمنتجة إلنزيمات الكيتيناز وتحديد الخصائص المورفولوجية والجزيئية للفطريات المجهريةبناء ً على جيناتITSالريبوسومية. تم تحضير عينات التربة منRaden Soerjo Forest Park Malangلعزل الفطريات. تم تحديد الفطر المنتج إلنزيم الكيتيناز من العزلة من وجود منطقة صفراء على وسط أجارالكيتين مع إضافة البروموكريسول األرجواني كمؤشر لتغير اللون. يتم التعرف على الفطريات على مستوىالجنس من خالل مالحظة الخصائص العيانية للعزالت مثل لون المستعمرة، وشكل المستعمرة، ونسيج السطحالعلوي، ونسيج السطح السفلي، باإلضافة إلى الخصائص المجهرية للعزالت مثل الواصلة، والكونيديا،وترتيب الجراثيم. تم إجراء تحديد مستوى األنواع جزيئيًا باستخدام البادئات العالميةITS1وITS4.نجحتنتائج اإلنتخاب لوجود المنطقة الصفراء في اختيار سبع عزالت ذات إمكانية كمصادر إلنتاج إنزيم الكيتينازوهيSC2، SC6، SC8، SC12، SC13، SC14،وSC23.أظهر التحديد المورفولوجي والجزيئي أنالعزلةSC2كانت مشابهة لـميتارهيزيوم قويتشوينس، عزلSC6له أوجه تشابه معالبنسليوم أبيدجانوم،SC8لديه أوجه تشابه معالبنسيليوم داالي،SC12مشابه لـالرشاشيات األنبوبية،SC13يشبهالبنسليومالسيترينوم،SC14مشابه لـالبنسليوم فيرجاتوموSC23مشابه لفوركاستيريجميوم فوركاتوم.يعد هذا البحثبمثابة جهد أولي لمعرفة أي الفطريات لديها القدرة األكبر على إنتاج إنزيم الكيتيناز.