Variasi laju alir pada Isolasi Steroid dan Triterpenoid Alga Merah Eucheuma Cottonii Metode Kromatografi Kolom

ABSTRAK

Isolasi senyawa steroid dan triterpenoid pada alga merah Eucheuma cottonii telah dilakukan menggunakan kromatografi kolom dengan memvariasikan laju alir. Ekstraksi senyawa aktif pada Eucheuma cottonii menggunakan metode maserasi dengan pelarut metanol. Ekstrak kasar dihidrolisis menggunakan HCl 2 N dan difraksinasi dengan pelarut petroleum eter. Fraksi peroleum eter diuji dengan reagen Lieberman-Burchard. Kemudian dilakukan pemisahan dengan metode kromatografi kolom basah dengan variasi laju alir yang digunakan yaitu 1 ml/menit; 1,5 ml/menit; dan 2 ml/menit menggunakan eluen n-heksana:etil asetat dengan perbandingan 4,25 : 0,75. Hasil pemisahan dimonitoring menggunakan KLTA. Hasil monitoring terbaik diidentifikasi menggunakan FTIR.

Hasil penelitian menunjukkan rendemen ekstrak metanol sebesar 15,587 % dan rendemen fraksi PE 6,9 %. Pemisahan kolom dengan laju alir terbaik adalah 2ml/menit, diperoleh 1 fraksi yang di duga senyawa steroid dengan rendemen 3,3 % dan 2 kelompok fraksi yang diduga senyawa triterpenoid triterpenoid masing-masing 1,7% dan 2,8%. Hasil analisis senyawa fraksi ke-1 (steroid 1) memberikan informasi gugus O-H, C=O, –CH alifatik, C-H tekuk, C=C non konjugasi, dan C-O alkohol, sedangkan senyawa fraksi ke-2 (triterpenoid 1) memberikan informasi gugus OH, C-O alkohol, C-H alifatik, C-H tekuk, C=O karboksilat, dan C=C non konjugasi dan fraksi ke-3 (triterpenoid 2) memberikan informasi gugus fungsi berupa OH, C-O alkohol, C-H alifatik, C-H tekuk, C=O karbonil dan C=C non konjugasi.

ABSTRACT

Isolation of steroids and triterpenoids compounds in red algae Eucheuma cottonii was done using column chromatography by varying the flow rate. Extraction of active compounds on Eucheuma cottonii was done by maseration method using methanol. Then, the crude extract was hydrolyzed using HCl 2 N and fractionated with petroleum ether. The peroleum ether fraction was tested with Lieberman-Burchard reagent. Then it separated using slurry column chromatography method. Variations of flow rate were used 1ml/ min; 1.5ml / min; and 2 ml/min, the eluent was n-hexane: ethyl acetate with ratio 4.25: 0.75. Separation results were monitored using Analytical TLC. The best separation result (more single spot in Analytical TLC) was identified using FTIR.

The results showed that the yield of methanol extract was 15.587% and the yield of fraction of Petroleum ether was 9.25%. The best column separation was separation result with flow rate 2ml/min. The yield of separation was 1 fraction indicated as steroid (3,3%) and 2 fractions indicated as triterpenoid (1,7% and 2,8%). The analysis from FTIR gave informations about the functional group of first fraction (steroid fraction) were O-H, C=O, –CH alifatic, C-H bend, C=C non conjugation, and C-O alcohol, while second fraction functional groups (first triterpenoid fraction) were OH, C-O alcohol, C-H alifatic, C-H bend, C=O carboxylates, and C=C non conjugation and third fraction functional groups (second triterpenoid fraction) were OH, C-O alkocol, C-H alifatic, C-H bend, C=O carbonyl and C=C non conjugation.

مستخلص البحث

إجراءت العزلة المركبة السترويد و التريترفنويد في الطحالب الحمراء Eucheuma cottonii باستخدام اللوني العمود من خلال تغيير الرسوم المياه . استخدم استخراج المركب النشط في Eucheuma cottonii بطريقةالنقع مع الميثانول. وتحلل استخراج النفط الخام باستخدام HCl 2 N ويجزأ مع الفتروليوم الاتير. تم اختبار ها مع كاشف ليبرمان بورشارد. ثم يفصل من العمود اللوني الرطب مع اختلاف الرسوم المياه بقدر 1 مل/دقيقة، و1،5 مل/دقيقة، 2مل/دقيقة باستخدام شاطف ن الهكسان: الإيثيل الخلات يعنى 4,25 : 0,75 مل. ويتم النتائج الرصد تستخدم الفصل KLTA وشكلت بقعة مع كاشف ليبرمان بورشارد. تحدد نتائج الأفضل الرصد باستخدام مطياف الضوء على التحويل الفورية تحت الحمراء (FT-IR)

وأظهرت النتائج أن الاستخراج الميثانول يعنى 15.587٪ وجوء الكسر هو 9.6.٪ PE. الفصل العمود مع أفضل الرسوم المياه يعنى 2 مل/دقيقة حصل جزءا من السترويد بعائد 3،3% و مجموعتان للجزء التريترفنويد التوالي 1،7% و 2،8%. نتائج تحليل المركبات الستيرويد توفر المعلومات مجموعة –OH, C=O, -CH, C=C, C-O, -C(CH3)2 غيمينال الثنائي ، في حين أن مركبات التريترفينويد الاولى تعطى المعلومات مجموعة –OH، كربوكسلاتC=O، C=C, -C(CH3)2و C-OH الكحول والتريترفينويد الثانىة تعطئ المعلومات مجموعة –OH, -CH, C=C, C=O ,-C(CH3)2, CH2 و C-OHالكحول