Variasi laju alir elusi pada pemisahan steroid dan triterpenoid fraksi petroleum eter mikroalga Chlorella sp. dengan kromatografi kolom

ABSTRAK

Steroid dan triterpenoid merupakan metabolit sekunder yang umumnya terkandung dalam tumbuhan termasuk dalam tumbuhan tingkat rendah seperti mikroalga Chlorella sp. dan memiliki manfaat diantaranya sebagai antioksidan dan antibakteri. Penelitian ini bertujuan memisahkan senyawa steroid dan triterpenoid dari mikroalga Chlorella sp. menggunakan kromatografi kolom dengan variasi laju alir elusi.

Chlorella sp. dikultivasi dalam medium ektrak tauge (MET) 4% dan dipanen pada hari kesepuluh, selanjutnya dimaserasi dengan metanol dan dihidrolisis dengan HCl 2 N lalu dipartisi dengan petroleum eter. Fraksi petroleum eter dipisahkan lebih lanjut menggunakan kromatografi kolom basah dengan eluen n-heksana : etil asetat (4:1) dan variasi laju alir elusi 1 mL/menit ; 1,5 mL/menit ; 2 mL/menit. Eluat dimonitoring dengan KLTA dan fraksi dengan noda tunggal dari laju alir terbaik diidentifikasi dengan FTIR.

Hasil penelitian menunjukkan rendemen ekstraksi maserasi sebesar 24,652 % dan rendemen partisi sebesar 22,72 %. Hasil monitoring KLTA diperoleh fraksi dengan noda tunggal dari laju alir 1 mL/ menit ; 1,5 mL/menit dan 2 mL/menit berturut-turut sebanyak 2, 3, dan 1 fraksi. Identifikasi FTIR menunjukkan adanya gugus fungsi O-H, C-OH sekunder, geminal dimetil, CH3, -CH2-, C=O ester, dan C=C non konjugasi.

ABSTRACT

Steroids and triterpenoids are secondary metabolites commonly contained in plants including in low-level plants such as microalgae Chlorella sp. and has benefits as antioxidants and antibacterials. This research aims to separate steroid and triterpenoid compounds from Chlorella sp. using column chromatography with varying flow rate elution.

Chlorella sp. cultivated in bean extract medium 4% and harvested on tenth day, then macerated with methanol and hydrolyzed with HCl 2N after that partitioned with petroleum ether. Petroleum ether fraction were further separated by column chromatography with eluen n-hexane: ethyl acetate (4: 1) and variation of flow rate elution were 1 mL/min; 1.5 mL/min; 2 mL/min. Eluat monitored with analytical TLC and fraction with single spot from best flow rate identified by FTIR.

The result of research showed percent of yield from maceration were 24,652% and partition were 22,72%. Analytical TLC monitoring results obtained fractions with single spot from flow rate 1 mL/min; 1,5 mL/min and 2 mL/min respectively were 2, 3, and 1 fractions. FTIR identification shows the presence of functional group O-H, C-OH secondary, geminal dimethyl, CH3, -CH2-, C=O esther, and C=C non conjugate.

مستخلص البحث

الستيروويد و التريترفينويد المركبات الثانوية التي ترد في النباتات بما فيه فى مستوى المنخفض الطحالب ولها فوائد مثل مضادات الأكسدة ومضاد للجراثيم. يهدف هذا البحث يعزل الستيروويد و التريترفينويد من الطحالب Chlorella sp. باستخدام اللوني العمود مع وجود اختلافة التدفق الشطف.

Chlorella sp. يزارع في المتوسط استخراج الفصوليا المبرعمة (MET) 4% وتحصد في اليوم العاشر، ثم تكامل مع الميثانول وتحلل مع حمض الهيدروكلوريك2N وتقسيم مع البترول الأثير. الاستخراج البترول الأثير يفصل باستخدام اللوني العمود الرطب مع شاطف ن الهكسان: الإيثيل الخلات (4:1) و الاختلافة التدفق الشطف يعنى من 1 مل/دقيقة ;1.5 مل/دقيقة و 2 مل/دقيقة. رصدت الكسور التي حصلت عليها طبقه رقيقه التحليل اللوني (KLTA) و الاستخراج مع بقعة واحدة على أفضل التدفق الشطف محدد بالتحويل الفورية تحت الحمراء (FT-IR).

وأظهرت النتائج العائد الاستخراج النقع بقدر 24.652٪ وبلغت التقسيم 22.72٪. نتائج الرصد طبقه رقيقه التحليل اللوني(KLTA) الحصول علي بقعة واحدة من التدفق الشطف1 مل/دقيقة ;1.5 مل/دقيقة و 2 مل/دقيقة متوال اثنين، اثنين و واحد الاستخراج. تحديد تستخدم FTIR ان ظهرت المجموعات الوظيفية C-OH , O-H الثانوي، غيمينال ثنائي ميثيل ،C=O استر ، CH3, -CH2, C = C, غير اقتران.