Pemisahan dan identifikasi Senyawa Steroid hasil Hidrolisis Ekstrak Metanol Alga Merah (Eucheuma Cottonii) perairan wongsorejo banyuwangi menggunakan Kromatografi Lapis Tipis dan LC-MS

ABSTRAK

Steroid merupakan senyawa bioaktif alami yang dominan dalam Eucheuma cottonii yang berpotensi sebagai antioksidan, antibakteri, antikanker, antidiabetik, antiinflamasi, antivirus, dan sitotoksin, sehingga penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hasil pemisahan steroid ekstrak metanol alga merah Eucheuma cottonii dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan identifikasi steroid menggunakan UV-Vis dan LC-MS.

Penelitian dilakukan dengan mengekstrak senyawa steroid dengan cara maserasi menggunakan pelarut metanol. Ekstrak kasar yang diperoleh dihidrolisis dengan HCl 2N. Hasil yang diperoleh kemudian diuji fitokimia dan dipisahkan menggunakan KLT. Proses KLT terdiri dari KLT Analitik, KLT Preparatif dan KLT 2 Dimensi. Identifikasi steroid menggunakan UV-Vis dan LC-MS.

Berdasarkan hasil maserasi diperoleh randemen ekstrak sebesar 15,587% sedangkan ekstrak hasil hidrolisis diperoleh randemen sebesar 13,603%. Uji fitokimia pada ekstrak kasar maserasi maupun ekstrak hasil hidrolisis positif terhadap steroid/triterpenoid, alkaloid, flavonoid, tanin maupun saponin. Pemisahan steroid dilakukan dengan menggunakan KLT. Eluen n-heksana:etil asetat (17:3) merupakan eluen terbaik dalam pemisahan menggunakan KLTA dengan terbentuknya 7 noda. Sedangkan terbentuk 10 noda dengan 5 senyawa steroid pada KLTP. Uji kemurnian steroid menggunakan KLT 2D dimana diperoleh satu senyawa tunggal yaitu pada noda ke-1 dengan Rf 0,861. Berdasarkan identifikasi menggunakan UV-Vis diperoleh panjang gelombang maksimum 208 nm sedangan hasil LC-MS menunjukkan adanya senyawa steroid jenis fucosterol, β-sitosterol dan demosterol.

ABSTRACT

Steroid is the dominant natural bioactive compounds in Eucheuma cottonii which have potential as antioxidant, antibacterial, anticancer, antidiabetic, antiinflammatory, antiviral, and cytotoxin. So, in this research was intending to knowing of steroid separating result in metanol extract using Thin Layer Chromatography (TLC) and identified by UV-Vis and LC-MS.

The experiment was did by extracted the steroid compound by maseration using methanol solvent. The rude extract from maseration was hydrolyzed by hydrochloric acid. The sample from hydrolysis has fitochemical tested and separated using TLC. The TLC process arranges of analytic TLC, preparative TLC and 2 dimention TLC. Identification of steroid compound by UV-Vis and LC-MS.

Maseration resulting rendenment of the extract about 15,587%, beside the rendement from hydrolysis about 13,603%. Fitochemical tested for rude extract from maseration nor hydrolysis was positive match to steroid/terpenoid, alkaloid, flavonoid, tannin although saponin. Separated of steroid has done by TLC. N-hexane etyl acetate (17:3) eluent was the best in ATLC separated with 7 spots formed. Ten spots with PTLC. Purity of compound has determined by 2D TLC where was obtainable single compound at spot -1 with Rf 0,861. Based on identification of steroid compound by UV-VIS the maximum wavelength was 208 nm and LC-MS identification result showed that there are steroid type such fucosterol, β-sitosterol dan demosterol in sample.

مستخلص البحث

ستيرويدية هو مركبات بيولوجيا الطبيعي في (Eucheuma cottonii) الذي ٳمكانية كما: مضادة للأكسدة، مضادة للجراثيم، مضادة للسرطان، مضادة للفيروسات، مضادة للتهابي، مضادة لمرض السكر والسامة للخلايا، حتى هذا البحث يهدف لمعرفة نتائج الانفصال ستيرويدية استخراج الميثانول طخلب الأحمر(Eucheuma cottonii)، بكروماتوغرافي صفاحة الرقيف (KLT) وتعرف المركبات باستعمال UV-Vis وLC-MS.

استعمل هذا البحث باستخراج مركبات ستيرويدية بطريقة الغرق ميثانول. استخراج النفط لالذي حصل يحليل الماء ب2N HCl. النتائج الذي قد حصل ثم يعاير كيميائي النباتي ومنفصلة باستخدام KLT. عملية KLT في هذا البحث يتكون من KLT التحليلي، KLT الإعدادي, و KLTقياسين. مركبات ستيرويدية محدد بالطيفي UV-VIS و LC-MS.

على أساس نتائج الغرق حصل راندمن استخراج تبلغ ١٥٬٥٨% أما استخراج نتائج تحليل الماء حصل راندمن تبلغ ١٣٬٦۰٣%. الاختبار كيمياء النباتي في استخراج النفط ميثانول واستخراج تحليل الماء منه الاجابي على ستيرويدية أو تيرفينويدية، قلويداتية، فلافونويدية، دياعين، والصابونين. استعمل انفصال الستيرويدية باستخدام KLT. شاطف الأجيد هكسان إيثيل أسيتات (۱٧:٣)هو شاطف بالانفصال استخدام KLT التحليلي بشكل ٧ بقاع. أماتشكل ۱۰ بقاع بخمسة مركبات ستيرويدية في KLT الإعدادي. اختبار عفة ستيرويدية باستخدام KLTقياسين أينما حصل أحد المركبات الفردية يعني في بقاع الأول بثمن rf۰٬٨٦١. على أساس التعريف باستخدام UV-Vis حصل طول الموج الفائق ٢۰٨ nm أما النتائج LC-MS إيجابي يحتمل على ستيرويديةمن نوع-fucosterol ,بيتا-سيتوستيرول ,loretsomseD