Pemisahan Senyawa Steroid Fraksi Etil Asetat hasil Hidrolisis Ekstrak Metanol Mikroalga Chlorella Sp. menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan identifikasinya menggunakan Spektrofotometer FTIR

ABSTRAK

Chlorella sp. merupakan salah satu jenis mikroalga ciptaan Allah SWT yang memiliki potensi cukup besar dalam menghasilkan produk-produk yang bermanfaat. Chlorella sp. dapat digunakan sebagai bahan obat dan mengandung senyawa steroid. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui profil hasil pemisahan senyawa steroid fraksi etil asetat hasil hidrolisis ekstrak metanol mikroalga Chlorella sp. dengan KLT analitik, KLT preparatif dan KLT dua dimensi dan identifikasi senyawa steroid dengan spektrofotometer FTIR.

Kultivasi mikroalga Chlorella sp. dilakukan dengan menggunakan Medium Ekstrak Tauge (MET). Biomassa yang dihasilkan kemudian dikstraksi secara maserasi menggunakan pelarut metanol. Ekstrak metanol kemudian dihidrolisis dan dipartisi menggunakan pelarut etil asetat. Hasil hidrolisis ekstrak metanol dilakukan uji fitokimia untuk mengetahui kandungan senyawa aktif metabolit sekunder terhadap ekstrak mikroalga Chlorella sp., dilanjutkan dengan identifikasi senyawa steroid dengan KLT analitik untuk memperoleh eluen terbaik. Pemisahan senyawa steroid dilakukan dengan KLT preparatif sedangkan uji kemurnian isolat steroid dilakukan dengan KLT dua dimensi. Identifikasi senyawa steroid dengan spektrofotometer FTIR.

Hasil penelitian diperoleh rendemen ekstrak metanol mikroalga Chlorella sp. sebesar 13,71 %, sedangkan rendemen ekstrak hasil hidrolisis dan partisi sebesar 49,323 %. Hasil uji fitokimia terhadap ekstrak hasil hidrolisis mikroalga Chlorella sp. menunjukkan keberadaan steroid dengan terbentuk warna hijau kebiruan ketika ditambahkan reagen Leebermann-Burchard. Ekstrak hasil hidrolisis diidentifikasi menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan diperoleh eluen terbaik yaitu n-heksana : etil asetat (4:1) yang menghasilkan 12 noda. Eluen tersebut digunakan pada KLT preparatif dan menghasilkan 10 noda. Noda ke-9 pada Rf 0,716 berwarna hijau diduga merupakan senyawa steroid. Uji kemurnian isolat steroid dengan KLT dua dimensi menghasilkan noda tunggal. Identifikasi senyawa steroid dengan spektrofotometer FTIR menunjukkan bahwa isolat diduga merupakan senyawa steroid yang memiliki C=C, C=O, C-OH primer, C-OH tersier, OH dan gem dimetil.

ABSTRACT

Chlorella sp. is one kinds of microalgae creation of Allah that have large enough potential to produced useful products. Chlorella sp. can be used as a medicine and containing steroid compounds. This research aimed to know the profile of the results of the separation of steroid compounds hydrolysis of ethyl acetate fraction of methanol extract of microalgae Chlorella sp. with TLC analytical, preparative TLC and two- dimensional TLC and identification of steroid compounds with FTIR spectrophotometer.

Cultivation of microalgae Chlorella sp. performed using Sprouts Extract Medium (MET). The biomass is then extracted with maceration using methanol. Methanol extract then hydrolyzed and partitioned using ethyl acetate solvent. The results of hydrolysis of the methanol extract phytochemicals test to fine out the content of active compounds of secondary metabolites to extract microalgae Chlorella sp., followed by identification of steroid compounds with analytical TLC to obtain the best eluent. Separation of steroid compounds made with preparative TLC purity test isolates while steroids do with the two-dimensional TLC. The identification of steroid compounds with FTIR spectrophotometer.

The results were obtained yield of methanol extract of microalgae Chlorella sp. of 13,71%, while the yield of hydrolysis extract and partition of 49,323%. The results of the phytochemical test extracts of microalgae Chlorella sp. hydrolysis showed the presence of steroids with formation of a bluish green color when it was added Leebermann- Burchard reagent. The results of the extracs hydrolysis were identified using Thin Layer Chromatography (TLC) and obtained the best eluent is n-hexane: ethyl acetate (4: 1) which resulted in 12 stains. The eluent used in the preparative TLC and produce 10 stains. The stain 9th green at Rf 0,72 a suspected steroid compounds. The purity test isolated steroid produces a two-dimensional TLC single spot. Identification of steroid compounds with FTIR spectrophotometer showed that isolates suspected of steroid compounds that have C=C, C=O, C-OH primary, tertiary C-OH, OH and dimethyl gem.