Isolasi dan identifikasi bakteri asam laktat (BAL) dari usus halus itik mojosari (Anas plathyrinchos)

INDONESIA:

Bakteri asam laktat (BAL) merupakan jenis bakteri yang dapat menjaga keseimbangan mikroflora dalam saluran pencernaan ternak seperti Itik Mojosari (Anas plathyrinchos). Salah satu organ saluran pencernaan yang menjadi habitat BAL adalah usus halus. Keberadaan bakteri asam laktat di dalam usus halus sangat diperlukan untuk menghambat pertumbuhan bakteri patogen yang ada dalam usus halus ternak. Untuk mendapatkan kultur bakteri asam laktat, perlu dilakukan isolasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri asam laktat dari usus halus itik Mojosari dengan menggunakan media de Man Rogosa Sharpe (MRS).

Penelitian ini bersifat deskriptif kualitatif. Tahap-tahap yang dilakukan meliputi tahap pengambilan sampel usus halus dengan cara mengeluarkan digesta yang ada di dalamnya. Kemudian direndam ke dalam media de Man Rogosa Sharpe (MRS) broth dan diinkubasi selama 24 jam untuk pengayaan BAL. Selanjutnya dilakukan pengenceran mulai dari 10-1 sampai 10-10. Kemudian hasil pengenceran 10-3 sampai 10-10 ditanam ke dalam media MRS agar dengan metode tuang (pour plate) dan diinkubasi selama 48 jam. Setelah 48 jam dilakukan pengamatan morfologi koloni berdasarkan bentuk, tepian, elevasi, struktur dalam dan warna. Koloni tersebut kemudian dimurnikan dengan metode quadrant streak pada media MRS agar dan diinkubasi kembali selama 48 jam pada suhu ruang. Koloni murni yang diperoleh ditumbuhkan pada media MRS agar miring dan dipakai sebagai stok isolat untuk uji selanjutnya.

Uji lanjutan meliputi uji pewarnaan gram, katalase, pewarnaan endospora dan identifikasi dengan Microbact 12B. Hasil uji pewarnaan gram diperoleh 13 isolat bakteri bentuk batang dan bulat dengan rincian 8 isolat bakteri gram positif dan 5 isolat bakteri gram negatif. Pada uji katalase dan endospora, hanya bakteri gram positif bentuk batang saja yang dilakukan pengujian yaitu isolat UI1, UI2, UI6 dan UI12. Hasil uji katalase dan endospora menunjukkan hasil negatif. Hal ini bisa dipastikan bahwa keempat isolat adalah bakteri asam laktat (BAL) kelompok Lactobacillus. Selanjutnya keempat isolat tersebut diidentifikasi dengan Microbact 12B. Hasil identifikasi menunjukkan bahwa UI1 dan UI2 teridentifikasi sebagai Lactobacillus plantarum, UI6 teridentifikasi Lactobacillus brevis dan UI12 teridentifikasi sebagai Lactobacillus buchneri.

ENGLISH:

Lactid Acid Bacteria (LAB) is kind of bacteria which is keep the balance of microflora in the digestive canal of livestock such as Mojosari’s duck (anas plathyrinchos). One of the digestive canals which are to be the place of lactid acid bacteria is small intestine. A lactid acid bacteria in the small intestine is very needed to make the growing of pathogen bacteria slowly which is in the small intestine of livestock. To get the habits of lactid acid bacteria, need to do isolation. The purpose of this research is to isolate and identified lactid acid bacteria which is come from the small intestine of mojosari’s duck by using de Man Rogosa Sharpe (MRS) media.

This research uses the descriptive qualitative method. The steps which is done consist of taking sample of small intestine by taking out the digesta of small intestine. Than submerged the digesta into de Man Rogosa Sharpe (MRS) broth media and incubate for 24 hours to enrichment of BAL. Than doing the dilution from 10-1 up to 10-10. Than the result of dilution 10-3 up to 10-10 move to the jelly MRS media by using pour plate method and incubate for 48 hours, after 48 hours observed the morphological colony depending on the shape, border, elevation, internal structure and color. Than the colony is purred by using quadrant streak method in jelly MRS media and incubated again for 48 hours by the normal room temperature. The pure colony which is gotten will be grow up by using jelly MRS media and used as isolate stock for the next experiment.

The experiment continuation covers of experiment of coloring the gram, catalation, coloring the endospora and identificate by Microbact 12B. The result of coloring the gram is 13 isolate bacteria which is stem and circle by the details of 8 positive grams isolate bacteria and 5 negative grams isolate bacteria. In the experiment of catalation and endospora, just positive gram bacteria which shape is stem which consist of isolate UI1 experiment, UI2 experiment, UI6 experiment and UI12 experiment. The result of catalase and endospora showing the negative. Than we can conclude that the fourth bacteria is lactate acid bacteria (BAL) lactobacillus variety. Than the fourth bacteria is identificated by Microbact 12B. the result of identification showing that UI1 and UI2 is identificate as Lactobacillus plantarum, UI6 is identificate Lactobacillus brevis and UI12 is identificate as Lactobacillus buchneri.