Uji Toksisitas Senyawa Steroid hasil Kromatografi kolom basah Fraksi N-Butanol Ekstrak Metanol Alga Merah Eucheuma Cottonii dari perairan Wongsorejo Banyuwangi

ABSTRAK

Alga merah Eucheuma cottonii mengandung senyawa metabolit sekunder yang bermanfaat sebagai antioksidan dan bersifat toksik. Golongan senyawa yang bersifat toksik salah satunya adalah steroid. penelitian ini bertujuan untuk menguji toksisitas isolat senyawa steroid hasil kromatografi kolom basah dengan metode elusi gradien. Euceheuma cottonii dikering anginkan dan dihaluskan 90 mesh, kemudian di ekstraksi maserasi menggunakan metanol. Hasil ekstrak dihidrolisis meggunakan HCl 2N dan difraksinasi menggunakan n-butanol. Hasil fraksi dilakukan pemisahan dengan kromatografi kolom basah dengan campuran pelarut n-heksana:etil asetat (95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25 dan 70:30) dengan kecepatan laju alir 2 mL/menit hingga dihasilkan 272 vial. Selanjutnya dimonitoring menggunakan KLTA dengan pelarut n-heksana:etil asetat (17:3). Hasilnya diperoleh 10 fraksi besar dengan 2 isolat steroid menunjukkan warna hijau (B) dan biru (D) pada lampu UV 366. Isolat B dan D dilakukan uji toksisitas pada larva udang Artemia salina L menggunakan metode BSLT dengan konsentrasi 1,2,3,4 dan 5 ppm. Untuk mengetahui nilai LC50, dilakukan analisis probit uji toksisitas menggunakan MINITAB17 dan dilihat berdasarkan kematian larva udang. Nilai LC50 isolat B adalah 10,37 ppm dan isolat D adalah 7,55 ppm. Hasil isolat di identifikasi menggunakan spektroskopi FTIR menghasilkan serapan gugus OH, CSP3-H, CSP2-H, -CH2-, C=C, C-C dan CH(CH3)2 atau geminal dimetil.

ABSTRACT

Red algae Eucheuma cottonii contain secondary metabolite compound that is beneficial as an antioxidant and toxic. one of the red algae that is toxic is steroids. the purpose of this research is steroid toxicity test using column chromatography with gradient illusion method. Euceheuma cottonii dredged and smoothed 90 mesh, then in maceration extraction using methanol, then hydrolyzed using HCl 2N and fractionation using n-butanol. Fractional results are split with column chromatography with n-hexane:ethyl acetate solvent (95:5, 90:10, 85:15, 80:20, 75:25 and 70:30) with a flow rate of 2 mL/minute until 272 vials are generated. Furthermore, it is monitored using analytic thin layer chromatography (ATLC) with n-hexane:ethyl acetate solvent (17:3) produces 10 large fractions with 2 steroid isolates showing green (B) and blue (D) colors on UV 366 lights. Steroid isolates performed toxicity tests on shrimp larvae Artemia salina L using BSLT methods with concentrations of 1,2,3,4 and 5 ppm. To find out the value of LC50, a probit analysis of toxicity tests with MINITAB17 was conducted based on the death of shrimp larvae. The value of LC50 isolate B is 10.37 ppm and isolate D is 7.55 ppm. Isolate results identified using FTIR spectroscopy and results in the absorption of OH, Csp3-H, CSP2-H, -CH2-, C=C, C-C and CH(CH3)2 clusters or dimethyl geminals.

مستخلص البحث

الطحالب الحمراء (Eucheuma cottonii) يحتوي عن مركب مستقلب ثانوي مفيد مفيد كمضاد للأكسدة وسام. الستيرويدات هي إحدى فئات المركبات السامة. تهدف هذه الدراسة إلى اختبار سمية عزلات مركب الستيرويد من كروماتوغرافيا العمود الرطب باستخدام طريقة التصفية المتدرجة. تم تجفيف الطحالب الحمراء (Eucheuma cottonii) وطحن ٩٠ شبكة ، ثم استخلاص منقوع باستخدام ميثانول. تم تحلل المستخلص باستخدام HCl وتجزئته باستخدام ن بوتانول. تم فصل الكسر بواسطة كروماتوجرافيا العمود الرطب بمزيج مذيب من ن الهكسان: إيثيل الأسيتات (٥:٩٥ ،١٠:٩٠ ، ٨٥:15 ، ٨٠:20 ، ٧٥:25 و ٧٠:30) بمعدل تدفق ٢ مل/دقيقة. مما أدى إلى ٢٧٢ قارورة. ثم تمت مراقبته باستخدام طبقة رقيقة اللوني (TLC) مع ن الهكسان: إيثيل الأسيتات (١٧:3) كمذيب. تم الحصول على ١٠ كسور كبيرة مع عزلتين من الستيرويد النقي يظهر اللونان الأخضر (B) والأزرق (D) على مصباح الأشعة فوق البنفسجية ٣٦٦.
تم اختبار عزلات الستيرويد النقية من أجل السمية على يرقات الجمبري أرتيميا سالينا ل (Artemia salina L) باستخدام طريقة اختبار قاتلة الجمبري البحري (BSLT) بتركيز ١ ، ٢ ، ٣ ، ٤, ٥ جزء في المليون. لتحديد قيمة LC50 ، تم إجراء تحليل اختبار السمية بناءً على نفوق يرقات الجمبري مع MINITAB١۷. كانت قيمة LC50 للعزل B ١٥.3٧جزء في المليون والعزل D ٧.55 جزء في المليون. تم تحديد نتائج العزلات باستخدام موجات أدى التعرف على العزلات B و D باستخدام فورييه تحويل الأشعة تحت الحمراء (FTIR) إلى امتصاص مجموعات OH ، CSP3-H CSP2-H، -CH2- ، C=C ، C-C و CH(CH3)2 أو ثنائي ميثيل.