Uji Sitotoksisitas Ekstrak Etanol 96% Daun Semanggi (Marsilea crenata C.Presl) pada sel hFOB 1.19 dengan Metode Microtetrazolium (MTT) Assay

مستخلص البحث

موليدية، نبيلة روشا. 2020. اختبار سمية مستخرجة الإيثانول 96 % ورقة السراخس المائية (Marsilea crenata C.Presl) على خلية hFOB 1.19 بطريقةMicrotetrazolium (MTT) Assay. البحث الجامعي. قسم الصيدلة، كلية الطب والعلوم الصحية بجامعة مولانا مالك إبراهيم الإسلامية الحكومية مالانج. المشرف الأول: برهان معارف ز. أ.، الماجستير. المشرف الثاني: ميلينا راتنا د.، الماجستيرة.
الكلمات الرئيسية: السراخس المائية، اختبار السمية، خلية hFOB 1.19، MTT Assay.
السراخس المائية (Marsilea crenata C.Presl) هي النبات الذي استخدمه شعب إندونيسي، خاصة في جاوى الشرقية. وغالبا ما يستخدم هذا النبات كعنصر غذائي و طب تقليدي. والسراخس المائية لها محتوى مركب فيتويستروجين، حيث كانت وظيفته وبنيته تساوي هرمون الاستروجين في جسم الإنسان. الهدف من هذا البحث هو معرفة قيمة IC50 والسمية الخلوية من مستخرجة الإيثانول 96% ورقة السراخس المائية على خلية hFOB 1.19. الطريقة المستخدمة لاختبار هذه السمية الخلوية هي طريقة Microtetrazolium (MTT) Assay وقراءتها باستخدام ELISA Reader. تم إعطاء المستخرجة على الخلية في microplate-96 well مع تباين جرعة من 62.5 ففم؛ 125 ففم؛ 250 ففم؛ 500 ففم؛ 1000 ففم؛ 2000 ففم و 4000 ففم. ثم أضاف كاشف MTT 100µL، الاختضان لمدة 2-4 ساعات، وأضاف SDS 10٪ كالسدادة وأجريت القراءة باستخدام ELISA Reader. تستخدم نتائج هذه القراءات لحساب قيمة IC50 التي تشير إلى مستوى السمية الخلوية من مستخرجة الإيثانول 96% ورقة السراخس المائية. وكانت قيمة IC50 المحصولة هي 151.171 ميكروجرام / مل. واستنادا من تلك النتيجة فإنها آمنة وغير سامة إذا وضعت في المواد الأدوية.

ABSTRACT

Semanggi (Marsilea crenata C.Presl) is one of the plants that have been used by Indonesian people, especially East Java. This plant is often used as food and traditional medicine. Semanggi contains phytoestrogen compounds whose function and structure are the same as estrogen in human body. The purpose of this study is to determine the value of IC50 and the cytotoxicity of 96% ethanol extract of Marsilea crenata against hFOB cells 1.19. The method used for the cytotoxicity test is the microtetrazolium (MTT) Assay and reading using ELISA Reader. Cells on microplate-96 well were given extracts with a dose variation of 62.5 ppm; 125 ppm; 250 ppm; 500 ppm; 1000 ppm; 2000 ppm and 4000 ppm. Then the 100µL MTT reagent was added, incubated for 2-4 hours and 10% SDS was added as a stopper and read using ELISA Reader. The results of these readings are used as the calculation of IC50 values which can indicate the level of cytotoxicity of 96% M. crenata ethanol extract. The IC50 value obtained was 151,171 µg / ml. Based on these results the ethanol extract 96% M. crenata can be said to be safe and un-toxic if it is developed into a medicinal ingredient.

ABSTRAK

Semanggi (Marsilea crenata C.Presl) merupakan salah satu tanaman yang telah dimanfaatkan oleh masyarakat Indonesia, khususnya Jawa Timur. Tanaman ini sering digunakan sebagai bahan makanan dan obat tradisional. Semanggi diketahui memiliki kandungan senyawa fitoestrogen yang fungsi dan strukturnya sama dengan estrogen dalam tubuh manusia. Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah agar diketahui nilai IC50 dan sitotoksisitas dari ekstrak etanol 96% Marsilea crenata terhadap sel hFOB 1.19. Metode yang digunakan untuk uji sitotoksisitas ini adalah metode microtetrazolium (MTT) Assay dan pembacaan menggunakan ELISA Reader. Sel pada microplate-96 well diberikan ekstrak dengan variasi dosis 62,5 ppm; 125 ppm; 250 ppm; 500 ppm; 1000 ppm; 2000 ppm dan 4000 ppm. Kemudian ditambahkan reagen MTT 100µL, diinkubasi selama 2-4 jam dan ditambhakan SDS 10% sebagai stopper serta dilakukan pembacaan menggunakan ELISA Reader. Hasil dari pembacaan tersebut digunakan sebagai perhitungan nilai IC50 yang dapat menunjukkan tingkat sitotoksisitas ektrak etanol 96% M.crenata. Nilai IC50 yang didapatkan adalah 151,171 µg/ml . Berdasarkan hasil tersebut ekstrak etanol 96% M.crenata dapat dikatakan aman dan tidak bersifat toksik jika dikembangkan menjadi bahan obat.