Uji aktivitas antioksidan isolat steroid hasil kromatografi kolom fraksi n-Heksana mikroalga Chlorella sp.

INDONESIA :

Steroid merupakan salah satu senyawa metabolit sekunder yang terdapat di dalam mikroalga Chlorella sp. Steroid memiliki beberapa bioaktivitas, diantaranya adalah antioksidan, antibakteri, toksisitas, antiinflamasi, antitumor dan antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui nilai antioksidan dari isolat steroid mikroalga Chlorella sp. dengan menggunakan kromatografi kolom dalam pemisahannya. Sampel kering mikroalga Chlorella sp. diekstraksi maserasi menggunakan pelarut metanol. Ekstrak pekat hasil maserasi dihidrolisis dengan HCl 2 N dan dilanjutkan partisi dengan pelarut n-heksana. Ekstrak hasil partisi positif mengandung senyawa steroid dengan reagen Liebermann Burchard (LB). Identifikasi fraksi n-heksana menggunakan LC-MS/MS juga memberikan hasil bahwa fraksi n-heksana positif mengandung senyawa steroid jenis stigmasterol, kampesterol dan β-sitosterol. Pemisahan senyawa steroid dilakukan dengan kromatografi kolom menggunakan perbandingan eluen n-heksana:etil asetat sebesar 95:5; 90:10; 85:15 dan 80:20. Monitoring dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis Analitik (KLTA). Berdasarkan hasil monitoring, diperoleh 1 isolat yang diduga mengandung senyawa steroid serta 3 isolat yang diduga mengandung senyawa terpenoid. Isolat yang diduga mengandung senyawa steroid memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dengan nilai EC50 sebesar 6,224 ppm. Berdasarkan identifikasi isolat steroid menggunakan spektrofotometer UV-Vis diperoleh panjang gelombang maksimum isolat steroid adalah 204 nm. Spektra FTIR isolat steroid menunjukkan adanya serapan khas senyawa steroid seperti OH, CH2, C=C, C=O ester, C-O ester, geminal dimetil –CH(CH3)2, serta C-OH sekunder.

ENGLISH :

Steroids are one of the secondary metabolites found in microalgae Chlorella sp. Steroids have several bioactivity, including antioxidants, antibacterial, toxicity, antiinflammatory, antitumor and anticancer. This study aims to determine the antioxidant value of steroid isolate of microalgae Chlorella sp. by using column chromatography in the separation. Dry sample of microalgae Chlorella sp. macerated extraction using methanol solvent. The concentrated extract of maceration was hydrolyzed with 2 N HCl and continued with n-hexane solvent. The partitioned extract was positive containing steroid compounds with reagent Liebermann Burchard (LB). The identification of n-hexane fraction using LC-MS/MS also showed that the n-hexane fraction positively contained stigmasterol, campesterol and β-sitosterol steroid compounds. Separation of steroid compounds was carried out by column chromatography using a ratio of 95: 5 eluent n-hexane: ethyl acetate; 90:10; 85:15 and 80:20. Monitoring was carried out by Analytical Thin Layer Chromatography (ATLC). Based on ATLC obtained 1 isolate that assumted contain steroid compound and 3 isolate that assumted contain triterpenoid compounds. Steroid isolates has very strong antioxidant activity with an EC50 value of 6,224 ppm. Based on identification using a UV-Vis spectrophotometer obtained the maximum wavelength of steroid isolates is 204 nm. FTIR spectra showed absorption specific functional group of steroid such as –OH, CH2, C=C, C=O esters, C-O esters, geminal dimethyl –CH (CH3)2, and secondary C-OH.