Pemisahan steroid fraksi etil asetat makroalga Eucheuma cottonii menggunakan kromatografi kolom gradien eluen secara eksperimen dan studi in silico serta uji antioksidannya

INDONESIA:

Pemisahan senyawa steroid pada alga merah Eucheuma cottonii telah dilakukan secara eksperimen menggunakan kromatografi kolom basah dan konfirmasi secara in silico menggunakan simulasi dinamika molekuler. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui profil fraksi golongan senyawa hasil isolasi kromatografi kolom, aktivitas antioksidan isolat steroid, senyawa steroid yang ada di dalam isolat dan profil energi potensial interaksi molekuler antara senyawa steroid dengan kombinasi variasi gradien eluen.

Fraksi etil asetat alga merah dipisahkan menggunakan metode kromatografi kolom basah dengan variasi gradien eluen n-heksana : etil asetat 95:5; 90:10; 85:15; 80:20; 75:25; 70:30 mL. Isolat hasil kromatografi kolom dimonitoring menggunakan KLTA pada rentang vial ke 5 sampai vial 295. Secara in silico, pemisahan steroid pada variasi gradien eluen disimulasikan melalui profil energi interaksi steroid dengan eluennya. Metode yang digunakan yaitu metode simulasi dinamika molekuler menggunakan aplikasi Hyperchem.

Profil fraksi golongan senyawa hasil kromatografi kolom menunjukkan bahwa eluen 95:5 sampai dengan 90:10 memisahkan golongan senyawa 4 isolat steroid (isolat 2,3,4,5) dan eluen 85:15 sampai dengan 70:30 memisahkan golongan senyawa 3 isolat tritepenoid (isolat 6,8,9). Isolat steroid hasil kromatografi kolom diuji antioksidan menghasilkan EC¬50 20,92 ppm pada isolat 2 dan 5,146 ppm pada isolat 5, sedangkan pada kedua isolat steroid lainnya tidak memiliki aktivitas antioksidan. Hasil isolat dengan aktivitas antioksidan terbaik diidentifikasi menggunakan LC-MS/MS menunjukkan terdapat 5 jenis steroid yaitu fukosterol, desmosterol, kampesterol, β-sitosterol dan stigmasterol. Profil energi potensial interaksi molekuler antara senyawa steroid dan kombinasi eluen secara in silico tampak bahwa, kelima steroid larut dalam seluruh variasi eluen dari 95:5 sampai dengan 70:30 kecuali ada beberapa steroid yang tidak dapat larut pada variasi konsentrasi tertentu yaitu β-sitosterol pada eluen 95:5; 80:20 dan stigmasterol pada eluen 75:25.

ENGLISH:

Separation of steroid substances in the red algae Eucheuma cottonii has been carried out correctly using column chromatography and confirmation in silico using molecular dynamics simulation. The purpose of this study was to determine the profile of the compound group fraction isolated from column chromatography, antioxidant activity of steroid isolates, steroid compounds in isolates and potential energy profiles of molecular interactions between steroid compounds with a combination of eluent gradient variations.

Ethyl acetate fractions of red algae using chromatography using eluent n-hexane: ethyl acetate 95:5; 90:10; 85:15; 80:20; 75:25; 70:30 mL. Isolates from column chromatography were monitored using TLCA in the 5 range of the vial to vial 295. In silico, steroid separation in the variation of eluent gradients was simulated through the energy profile of steroid interactions with the eluent. The method used is the method of molecular dynamics simulation using the Hyperchem application.

The profile of the compound group fraction from column chromatography shows that eluents 95: 5 to 90:10 separate the compound groups 4 steroid isolates (isolates 2,3,4,5) and eluents 85:15 to 70:30 separating groups of compounds 3 tritephenoid isolates (isolates 6,8,9). Steroids isolates from antioxidant column chromatography produced EC50 20,92 ppm in isolates 2 and 5,146 ppm in isolates 5, whereas in the other two steroid isolates did not have antioxidant activity. The results of isolation using LC-MS/MS showed that there were 5 types of steroids namely fukosterol, desmosterol, kampesterol, β-sitosterol and stigmasterol. The profile of potential energy molecular interactions between steroid compounds and the combination of eluents in silico appears that, the five steroids dissolve in all eluent variations from 95:5 to 70:30 unless there are some insoluble steroids at certain concentrations of β-sitosterol at eluent 95:5; 80:20 and stigmasterol on eluent 75:25.