Metabolite profiling ekstrak bawang Dayak (Eleutherine palmifolia (L.) Merr.) dari berbagai daerah di Indonesia dengan metode HPTLC-Densitometri

مستخلص البحث

البصل السكري داياك Eleutherine palmifolia (L.) Merr.)) هو من إحدى النباتات التي تمكن استخدامها كمادة الأدوية العشبية. سيؤثر الفرق في مكان نمو هذا النبات الطبي على اختلاف محتويات المستقلبات. يهدف هذا البحث إلى معرفة تنميط المستقلبات من ستة أماكن نموه المختلفة، وهي: جاوى الغربية، جاوى الوسطى، جاوى الشرقية، كاليمانتان الشرقية، كاليمانتان الوسطى وكاليمانتان الجنوبية. تم تصنيع البصل السكري داياك من تلك الأماكن في شكل مسحوق simplisia ثم قياس محتوى رطوبته. تم إجراء استخراج العينات باستخدام طريقة الموجة فوق الصوتية (Ultrasound Assisted Extraction) ثم تذاب بالمبخر الدوراني (rotary evaporator) لحصول كثافة المستخرجة. تم إجراء تفعيل طور الحركة على تلك المستخرجة الكثيفة باستخدام طريقة كروماتوغرافيا طبقة رقيقة (KLT) لحصول طور الحركة الأمثل باستخدام طور الحركة من الكلوروفورم (٨) : الميثانول (٢) v/v و ن- هكسان (٦) : خلات الإيثيل (٤) v/v . طور الحركة الذي تم اختياره هو طور الحركة من الكلوروفورم (٨) : الميثانول (٢) v/v ثم استخدمت الباحثة لتحقيق صحة الطريقة مما يتضمن اختبار الدقة بنسبة التركيز ٠٠٠‚١٠ ففم و٠٠٠‚٢٠ ففم و اختبار الثبات عند ٠ ، ١٥، ٣٠، ٤٥، ٦٠، ٧٥ ٩٠٬ دقيقة. اختبار تنميط المستقلبات بالطريقة كروماتوغرافيا طبقة رقيقة عالية الأداء للكثافة (HPTLC-Densitometri) بنسبة التركيز ٠٠٠‚١٠ ففم مع ثلاث نسخ مكررة. يحتوي جميع العينات Rf ٠١٣, ٠٢٨, ٠٤٠, ٠٧١, ٠٨٧. وقامت الباحثة بتحليل تنميط المستقلبات باستخدام تحليل المكونات الأساسية (Principal Component Analisys) وتحليل العنقودي الهرمي (Hierarchical Clustering Analysis). أظهرت نتائج تحليل المكونات الأساسية أن البصل السكري داياك من ستة أماكن المختلفة له تنميط المستقلبات مختلفة وهناك ثلاث مستقلبات لها أثر كبير على تكوين مجموعة العينة، وهي Rf ٠٥٥, ٠٥٩, ٠٤٤. وأشارت نتائج تحليل العنقودي الهرمي إلى أنّ ستة أماكن تكون في نفس المجموعة.

ABSTRACT

Eleutherine palmifolia (L.) Merr. (E. palmifolia) is one of the plants that can be used as raw material for herbal medicines. The difference in the location of growing medicinal plants will affect the differences of metabolite content. This study aims to determine the profile of metabolites from 6 different locations, those are West Java, Central Java, East Java, East Kalimantan, Central Kalimantan and South Kalimantan. E. palmifolia from various locations is made a simplicia powder then measured the water content. Extraction was carried out using UAE and concentrated with rotary evaporator to get a thick extract. The thick extract was carried out by mobile phase optimization using TLC method and to obtain the optimal mobile phase used the mobile phase of chloroform: methanol (8:2 v /v) and n-hexane: ethyl acetate (6:4 v /v). The selected mobile phase of chloroform: methanol (8:2 v/v) were used for method validation which included precision testing with a ratio of concentrations of 10,000 ppm and 20,000 ppm and stability tests at 0, 15th, 30th, 45th, 60th, 75th and 90th minutes. The profile of metabolites was tested by HPTLC-Densitometry method using a concentration of 10,000 ppm with 3 replications. All samples contained Rf value 013, 028, 040, 071 and 087. Analysis of the metabolite profile conducted by PCA and HCA method. The results of metabolite profiling analysis with PCA showed that E. palmifolia from 6 different locations gave a different metabolite profiles and there were 3 metabolites which had a significant effect on the formation of sample clusters, with Rf value 055, 059, and 044. The results of the HCA analysis showed that all 6 regions are in the same cluster

ABSTRAK

Eleutherine palmifolia (L.) Merr. (E. palmifolia) adalah salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai bahan baku obat herbal. Perbedaan lokasi tumbuh tanaman obat akan berpengaruh terhadap perbedaan kandungan metabolit. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui profil metabolit dari 6 lokasi yang berbeda, yaitu Jawa Barat, Jawa Tengah, Jawa Timur, Kalimantan Timur, Kalimantan Tengah dan Kalimantan Selatan. E. palmifolia dari berbagai lokasi dibuat serbuk simplisia kemudian di ukur kadar airnya. Ekstraksi dilakukan menggunakan UAE kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator untuk mendapatkan ekstrak kental. Ekstrak kental yang diperoleh dilakukan optimasi fase gerak dengan metode KLT untuk mendapakan fase gerak yang optimal menggunakan fase gerak kloroform: metanol (8:2 v/v) dan n-heksana: etil asetat (6:4 v/v). Fase gerak yang terpilih kloroform: metanol (8:2 v/v) selanjutya digunakan untuk validasi metode yang meliputi uji presisi dengan perbandingan konsentrasi 10.000 ppm dan 20.000 ppm dan uji stabilitas pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 75 dan 90. Uji profil metabolit dengan metode HPTLC-Densitometri dengan menggunakan konsentrasi 10.000 ppm dengan 3 kali replikasi. Semua sampel mengandung Rf 013, 028, 040, 071 dan 087. Selanjutnya dilakukan analisis profil metabolit dengan PCA dan HCA. Hasil analisa profil metabolit dengan PCA menunjukkan bahwa E. palmifolia dari 6 lokasi yang berbeda memberikan profil metabolit berbeda dan terdapat 3 metabolit yang berpengaruh signifikan pada pembentukan kluster sampel yaitu Rf 055, 059, dan 044. Hasil analisa HCA menunjukkan bahwa ke-6 daerah berada pada satu kluster yang sama